ЩО ТАКЕ ПРОСТЕ ФАРБУВАННЯ? ВИДАТНІ РИСИ - БІОЛОГІЯ - 2025

Одного фарбування є фарбування процедури швидкою і простою , в якому використовуються єдиний барвник, тому його називають просто. В основному використовується для визначення морфології та організації клітин, наявних у пробі.

Клітини природно безбарвні, тому їх потрібно певним чином зробити видимими при огляді під мікроскопом.

Клітини щоки людини, забарвлені простим фарбуванням метиленовим синім.

Важливо відзначити, що барвники, які використовуються при простому фарбуванні, повинні бути основними з позитивним зарядом (катіонним), щоб вони могли мимовільно зв’язуватися з клітинною стінкою і цитоплазмою.

Ці клітинні структури негативно заряджені. Ось чому позитивно заряджений барвник притягується до клітин і зв’язується з ними спонтанно. Таким чином, всі клітини, присутні в зразку, швидко фарбуються.

Барвники, що застосовуються при простому фарбуванні

Є кілька основних плям, які можна використовувати в лабораторії мікробіології. Найбільш використовувані:

- Метиленовий синій.

- Фіолетова кришталь.

- Малахітовий зелений.

- Базовий фуксин.

Усі ці барвники добре працюють у бактеріях, оскільки мають позитивно заряджені (катіонні) кольорові іони (хромофори).

Часи фарбування для більшості цих плям порівняно короткі. Зазвичай вони становлять від 30 секунд до 2 хвилин, залежно від спорідненості барвника.

Важливо пам’ятати, що перед фарбуванням зразка простим фарбуванням його необхідно розширити і закріпити на склопакет (слайд); розширений і нерухомий зразок називається мазком.

6 кроків до простого фарбування

Крок 1

Помістіть гірку на стійку для фарбування і нанесіть потрібну пляму. Нехай діє відповідний час.

Зазвичай просте фарбування займає від декількох секунд до пари хвилин, залежно від використовуваної плями.

Спостереження

На цьому кроці важливо не перевищувати рекомендований час для використовуваного барвника, оскільки на листі можуть утворюватися кристали, утворюючи ті, що відомі як "артефакти", які спотворюють морфологію клітин.

Крок 2

Ретельно вимийте мазок із гірки дистильованою водою з пляшки або також повільно тече водопровідна вода, поки стік не стане прозорим. Зазвичай це займає 5-10 секунд.

Спостереження

Не слід наносити струмінь води безпосередньо на мазок, щоб уникнути того, що сила тієї ж самої шкоди зразку.

Якщо у вас немає дистильованої води, ви можете без проблем використовувати водопровідну воду, оскільки це не вплине на результат фарбування.

Крок 3

Розсуньте слайд всмоктуючими паперовими рушниками в одну сторону і не протираючи. Переконайтесь, що нижня сторона слайда чиста.

Крок 4

Поспостерігайте за підфарбованим мазком під мікроскопом. Почніть з найвіддаленіших цілей, щоб правильно розташувати область, яку ви хочете спостерігати, більш детально. Змініть ціль, щоб наблизитись до вибірки.

Спостереження

Для використання об'єктива з більшим збільшенням (як правило, 100X) слід занурювати масло, оскільки це допомагає світлу проникати краще, а зображення виглядає більш чітким. Використовувати покривало не обов’язково.

Крок 5

Нарешті, утилізуйте всі зразки у відповідному контейнері, який належним чином маркується «біологічна небезпека».

Список літератури

1. (2001). Мікробіологічні програми: Посібник з лабораторії із загальної мікробіології (8- ^е видання). Компанії McGraw-Hill.
2. Харіша, С. (2006). Вступ до практичної біотехнології (1 ^ст. ) Медіа брандмауера.
3. Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Попереднє фарбування бактерій: Прості плями. Поточні протоколи з мікробіології (Додаток 15), 1–5.
4. Поммервілл, Дж. (2013). Основи мікробіологічної лабораторії Алькамо (10- ^е ). Навчання Джонса і Бартлетта.
5. Прескотт, Х. (2002). Лабораторні вправи з мікробіології (5- ^е ). Компанії McGraw-Hill.
6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Принципи мікробіології (1 ^ст. ) Tata McGraw-Hill Education.