АНТИСТРЕПТОЛІЗИН O: КІЛЬКІСНА ОЦІНКА, ОБҐРУНТУВАННЯ, МЕТОДИКА, ПАТОЛОГІЇ - БІОЛОГІЯ - 2025

O КРМ буде антитіла , генеровані у відповідь на інфекцію , викликану Streptococcus Пірролідонілпептідази, також відому як стрептокок бета-гемолітичний A. Цією група виробляє два екзотоксинів з гемолітичної називають активності стрептолізин «S» і «O» .

Стрептолізин S відповідає за бета-гемоліз, який відбувається в агарі крові, і, хоча він токсичний для певних клітин імунної системи, він не є антигенним. Хоча стрептолізин О, будучи лабільним до кисню, відповідає за гемоліз, що відбувається нижче агару крові, і це антигенно.

Streptococcus pyogenes / Діаграма того, що відбувається в тесті ASTO (реакція аглютинації). (Антитіла, пов'язані з частинками латексу, які містять специфічний антиген). Джерело: Користувач: Грехем Бордс / Алехандро Порто

Тому, коли клітини імунної системи взаємодіють зі стрептолізином О, виробляється специфічна імунна відповідь, яка генерує активацію лімфоцитів В. Ці клітини продукують антитіла, спрямовані проти стрептолізину О. Тому антитіла називають антистрептолізин О.

Streptococcus pyogenes викликає різні патології, серед яких: тонзиліт, ерізипела, імпетиго, післяродова лихоманка, скарлатина та септицемія. Анти-стрептолізин O антитіла з'являються через 8 - 30 днів після початку інфекції.

Більшість цих інфекцій є дуже поширеними у популяції, тому людям властиво мати антистрептолізинові антитіла до крові. Низькі титри вказують на минулу інфекцію з цією бактерією, але високий або підвищується титр вказує на недавню або поточну інфекцію.

Кількісне визначення антистрептолізину O антитіла

У лабораторії титр антистрептолізинових "О" антитіл можна виміряти за допомогою серологічного тесту. Тест на антистрептолізин О (ASTO) заснований на реакції аглютинації з латексом.

Це можна зробити напівкількісно, ​​звітування в кросах або титр також можна кількісно оцінити. Нормально і неважливо знайти значення до 200 МО / мл або Тодд одиниць / мл. Вище цього значення вважається позитивним та клінічно значущим.

Цей тест не вимагає від пацієнта голодування. Сироватку використовують як пробу, тобто кров пацієнта відбирають і поміщають в пробірку без антикоагулянта, потім центрифугують для отримання сироватки.

Основи методики ASTO

Методика використовує частинки латексу в якості підтримки для фіксації антигену стрептолізину О. Поглинені частинки антигену реагують на сироватку пацієнта. Якщо у пацієнта є антистрептолізин O антитіло, вони будуть зв'язуватися з антигеном, приєднаним до частинки латексу.

Це зв'язування викликає аглютинацію, яка макроскопічно помітна. Інтенсивність реакції прямо пропорційна концентрації присутніх антитіл.

Техніки

- Напівкількісна методика

Інтенсивність реакції може бути напів кількісно визначена в кросах. Для цього беруть та ставлять серологічну реакційну тарілку:

50 мкл сироватки та 50 мкл реагенту ASTO. Добре перемішайте дерев’яною зубочисткою і поставте в автоматичний міксер на 2 хвилини. Поспостерігайте. Якщо автоматичний ротатор недоступний, це потрібно зробити вручну.

Інтерпретація

Підвіска без грудочок (рівномірна): негативна

1. + = слабка реакція

2. ++ = незначна реакція

3. +++ = помірна реакція

4. ++++ = сильна реакція

Сироватки, позитивні з 3 та 4 хрестами, можна оцінити кількісно.

- Кількісна методика

Для кількісного визначення титру проводять серійні розведення 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

Для цього діють так: беруть 4 пробірки або пробірки Кан і на них наносять 0,5 мл фізіологічного сольового розчину. Потім в першу пробірку додають 0,5 мл сироватки пацієнта. Добре перемішується. Ця трубка відповідає розведенню 1: 2.

Згодом 0,5 мл переносять у пробірку 2 і добре перемішують. Ця пробірка відповідає розведенню 1: 4 тощо, до досягнення бажаного розведення.

Візьміть 50 мкл кожного розведення і прореагуйте з 50 мкл реагенту ASTO на планшеті з аглютинацією, як пояснено в напівкількості техніці.

Інтерпретація

Враховується найбільше розрідження, при якому спостерігається видима аглютинація. Розрахунки проводяться наступним чином:

ASTO = зворотна найвища позитивна розбавлення x чутливість методики (константа).

Приклад: Пацієнт із позитивною реакцією до 1: 8

ASTO = 8 х 200 МО / мл = 1600 МО / мл або Тодд Одиниці / мл

Довідкове значення

Нормальна доросла людина: до 200 МО / мл

Нормальні діти: до 400 МО / мл

рекомендації

Рекомендується встановити позитивний та негативний контроль з пацієнтами, щоб забезпечити оптимальний стан реагенту. Якщо позитивний контроль не агглютинируется або негативний контрольний аглютинат, реагент використовувати не можна.

Реакцію потрібно інтерпретувати через 2 хвилини, після закінчення цього часу вона не вірна, якщо є аглютинація. Це помилкові позитиви.

Гіперліпемічна сироватка заважає реакції. Вони можуть дати помилкові позитиви.

Ізольоване значення ASTO не дуже допомагає. Це повинно супроводжуватися симптомами.

Крім того, доцільно провести принаймні 2 вимірювання ASTO при підозрі на ревматизм або постстрептококовий гломерулонефрит, щоб продемонструвати підвищення рівня антистрептолізину O і таким чином підтвердити діагноз.

Патології з високими титрами антистрептолізину О

Анти-стрептолізинові антитіла збільшуються після перенесених стрептококових піогенів або ß-гемолітичної стрептококової групи А групи.

Серед них: гострий фарингіт, скарлатина, імпетиго, ерізипела, післяродова лихоманка та септицемія.

У деяких пацієнтів, які перенесли недавні або періодичні стрептококові інфекції, можуть розвинутися аутоімунні захворювання як наслідки або ускладнення постстрептококової інфекції, такі як гострий гломерулонефрит і ревматизм.

Пост стрептококових аутоімунних захворювань

Ревматизм

Це запальне ускладнення або наслідки, які можуть з’явитися через 1 - 5 тижнів після перенесеної стрептококової інфекції. Титри антистрептолізину О значно збільшуються через 4 - 5 тижнів після початку захворювання.

Високий титр АСТО направляє діагноз, але не пов'язаний з тяжкістю захворювання, а його зниження не означає поліпшення.

Антирептоптолізин O антитіла перехресно реагують на колагенові та м’язові волокна, впливаючи на певні органи (серце, шкіру, суглоби та нервову систему, серед інших).

Це ускладнення або наслідки виникають із ураженням серця, лихоманкою, нездужанням, не гнійним мігруючим поліартритом, хореєю тощо.

Гострий гломерулонефрит

Гострий гломерулонефрит - це не гнійна послідовність, яка виникає через осадження комплексів антиген-антитіло на базальній мембрані клубочкової тканини.

Утворення та циркуляція комплексів антиген-антитіло (ag-ac), породжених стрептококовими інфекціями, може призвести до ексудативних змін та запалення клубочків, протеїнурії та гематурії.

Ці комплекси ag-ac осідають у клубочку і активують каскад комплементу, що призводить до пошкодження клубочкового ендотелію. З цієї причини воно вважається аутоімунним захворюванням, оскільки імунна система індивіда пошкоджує власні тканини.

Антирептоптолізинові антитіла дуже високі, а рівень комплементу - низький.

Список літератури

1. Лабораторії Вінера. ASO латекс. 2000. Доступний за адресою: wiener-lab.com.ar
2. Автори Вікіпедії "Антистрептолізин О." Вікіпедія, Вільна енциклопедія. Вікіпедія, Вільна енциклопедія, 23 січня 2019. Веб. 19 липня 2019 року.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Титр антистрептолізину O для здоров'я та хвороб: рівні та значення. Педіатр Респ. 2012 рік; 4 (1): e8. Доступно у: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Як застосовувати титр антистрептолізину O. Arch Dis Child Educ Practice Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Доступно у: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Мікробіологічна діагностика. (5-е видання). Аргентина, редакція Panamericana SA
6. Гонсалес М, Гонсалес Н. 2011. Посібник з медичної мікробіології. 2-е видання, Венесуела: Дирекція засобів масової інформації та публікацій Університету Карабобо.