МІКРОСКОП ТЕМНОГО ПОЛЯ: ХАРАКТЕРИСТИКИ, ЧАСТИНИ, ФУНКЦІЇ - БІОЛОГІЯ - 2025

Темне поле мікроскопа це спеціальний оптичний прилад , який використовується в деяких лабораторіях. Це результат модифікації мікроскопії яскравих полів. Мікроскопія Темного поля може бути здійснена шляхом пересвітлення або за допомогою епі-освітлення.

Перший ґрунтується на блокуванні світлових променів, які потрапляють безпосередньо до конденсатора, за допомогою використання пристроїв, які втручаються до того, як світлові промені потрапляють до конденсатора.

Мікроскоп темного поля / Трепонеми, помічені в мікроскопах із темним полем. Джерело: Дітцель65 / Джудіт Міклоссі, Шандор Касас, Ен Д Зурн, Шерман Маккалл, Шен Ю та Патрік Л Макгір

Темне поле з пропущеним світлом дає можливість виділити структури, здатні спостерігати надзвичайно тонкі частинки. Структури видно з деяким заломленням або яскравістю на темному тлі.

У той час як ефект епі-освітлення досягається при падаючому або косому світлі. У цьому випадку мікроскоп повинен бути обладнаний спеціальним фільтром у формі півмісяця.

При падаючому освітленні спостережувані структури характеризуються поданням візуального ефекту у високому рельєфі. Ця властивість дозволяє виділити краї зважених частинок.

На відміну від яскраво-польової мікроскопії, темнопольна мікроскопія особливо корисна для візуалізації фресок, що містять зважені частинки, без будь-якого типу фарбування.

Однак він має ряд недоліків, серед яких те, що його не можна використовувати для сухих препаратів або фарбованих препаратів. Він не має гарної роздільної здатності. Крім того, для забезпечення хорошого зображення числова діафрагма цілей не може перевищувати конденсатора.

характеристики

Склад мікроскопа темного поля представляє важливі модифікації щодо світлого поля, оскільки основи обох мікроскопій протилежні.

У той час як у світлому полі світлові промені зосереджені так, що вони проходять безпосередньо через зразок, в темному полі промені розсіюються так, що до зразка досягають лише косий промінь. Потім вони розпорошуються одним і тим же зразком, передаючи зображення в бік об'єктиву.

Якби ви зосереджувались на слайді без зразка, спостерігалося б темне коло, оскільки без зразка нема чого розсіяти світло до цілі.

Для отримання бажаного ефекту у зоровому полі потрібне використання конкретних конденсаторів, а також діафрагм, які допомагають керувати світловими променями.

У темному полі зору елементи або частинки суспензії здаються яскравими і заломлюючими, тоді як решта поля темна, створюючи ідеальний контраст.

Якщо використовується косого або падаючого світла, у спостережуваних конструкціях виходить крайовий ефект із високим рельєфом.

Частини мікроскопа темного поля

Джерело: amazon.com

-Механічна система

Трубка

Це пристрій, за допомогою якого зображення, відображене та збільшене об'єктивом, подорожує, поки не досягне окуляра чи окулярів.

Перемішати

Це підтримка, де розташовані різні цілі. Цілі не фіксовані, їх можна зняти. Револьвер можна обертати таким чином, що ціль можна змінювати, коли оператор цього потребує.

Макро-гвинт

Цей гвинт використовується для фокусування зразка, він переміщується вперед або назад, щоб перемістити зразок ближче чи далі від цілі, а рух - гротескний.

Мікрометровий гвинт

Мікрометровий гвинт переміщується вперед або назад, щоб перемістити зразок ближче до цілі та далі. Мікрометричний гвинт використовується для дуже тонких або делікатних рухів, майже непомітних. Саме той досягає кінцевої спрямованості.

Валик

Це опора, де зразок опирається на слайд. Він має центральний отвір, через який проходять світлові промені. При переміщенні гвинтів макро- і мікрометрових ступенів ступінь йде вгору або вниз, залежно від руху гвинта.

Машина

Перевезення дозволяє пройти всю пробу з ціллю. Дозволені рухи назад і вперед і навпаки, і зліва направо і навпаки.

Тримаючи щипці

Вони розташовані на сцені, виготовлені з металу і призначені для утримування гірки, щоб запобігти її коченню під час спостереження. Важливо, щоб зразок залишався фіксованим під час його спостереження. Кріплення точно розміром для отримання слайда.

Рука або ручка

Рука з'єднує трубку з основою. Це місце, де повинен утримуватися мікроскоп, коли він буде переміщуватися з однієї сторони на іншу. Однією рукою хапається рука, а іншою тримається основа.

Основа або стопа

Як випливає з назви, це основа або опора мікроскопа. Завдяки підставі мікроскоп здатний залишатися нерухомим і стійким на рівній поверхні.

-Оптична система

цілі

Вони мають циліндричну форму. У них внизу лінза, яка збільшує зображення, що виходить із зразка. Цілі можуть бути різного масштабу. Приклад: 4,5X (збільшувальне скло), 10X, 40X та 100X (занурення).

Завдання занурення так називається, оскільки воно вимагає розміщення декількох крапель олії між об'єктом та зразком. Інших називають сухими мішенями.

Цілі друкуються з характеристиками, які вони мають.

Приклад: марка виробника, корекція кривизни поля, корекція аберації, збільшення, числова апертура, спеціальні оптичні властивості, занурення середовища, довжина трубки, фокусна відстань, товщина ковзання та кодове кільце колір.

Лінзи мають передню лінзу, розташовану внизу, і задню лінзу, розташовану вгорі.

Окуляри

Старі мікроскопи є монокулярними, тобто мають лише один окуляр, а сучасні мікроскопи - біноклі, тобто мають два окуляри.

Окуляри мають циліндричну та порожнисту форму. Вони мають збірні лінзи всередині, що розширюють віртуальне зображення, створене об'єктивом.

Окуляр приєднується до трубки. Останнє дозволяє переданому об'єктивом зображенню дістатись до окуляра, що ще раз збільшить його.

Окуляр у верхній частині містить лінзу, яка називається окуляр, а в нижній її частині розміщується лінза, яка називається колектор.

У нього також є діафрагма, і залежно від того, де вона знаходиться, вона матиме назву. Ті, що розташовані між обома лінзами, називаються окуляром Гюйгенса, а якщо він розташований після двох лінз, він називається окуляром Рамсдена. Хоча є й багато інших.

Збільшення окуляра коливається в межах 5X, 10X, 15X або 20X, залежно від мікроскопа.

Саме через окуляр або окуляри оператор може переглянути зразок. Деякі моделі поставляються з кільцем на лівому окулярі, яке є рухомим і дозволяє регулювати зображення. Це регульоване кільце називається діоптром.

-Світлові системи

Лампа

Він є джерелом освітлення і розташовується внизу мікроскопа. Світло галогенове і випромінюється знизу вгору. Загалом, лампа, яку мають мікроскопи, становить 12 В.

Діафрагма

Діафрагма мікроскопів темного поля не має райдужної оболонки; в цьому випадку це перешкоджає променям, що надходять від лампи, безпосередньо потрапляти до зразка, лише косі промені будуть торкатися зразка. Ті пучки, які розпорошені структурами, присутніми у зразку, - це ті, які пройдуть ціль.

Це пояснює, чому структури виглядають яскравими і світлими в темному полі.

Конденсатор

Конденсатор мікроскопа темного поля відрізняється від світлого поля.

Існує два типи: заломлюючі конденсатори та конденсатори відбиття. Останній у свою чергу поділяється на дві категорії: параболоїди та кардіоїди.

Конденсатори заломлення

Цей тип конденсатора має диск, який розміщений для заломлення променів світла, він може бути розташований над передньою лінзою або на задній стороні.

Імпровізувати конденсатор такого типу дуже просто, оскільки достатньо помістити перед передньою лінзою конденсатора диск, зроблений з чорного картону, менший за лінзу (діафрагму).

Світловий мікроскоп з яскравим полем може бути перетворений в мікроскоп темного поля за допомогою цієї підказки.

Конденсатори відбиття

Вони використовуються стереоскопічними мікроскопами. Існує два типи: параболоїди та кардіоїди.

• Параболоїди: вони мають тип кривизни, що називається параболоїдами через їхню схожість з параболою. Цей тип конденсатора широко використовується при дослідженні сифілісу, оскільки дозволяє спостерігати трепонеми.
• Кардіоїд : викривлення конденсатора схоже на серце, звідси і назва «кардіоїд», конденсатор з однойменною назвою. Він має діафрагму, яка регулюється.

Особливості

-Використовується для дослідження наявності паліподу Treponema pallidum у клінічних зразках.

- Також корисно спостерігати за Борреліасом та Лептоспірами.

-Ідеально для спостереження за поведінкою клітин або мікроорганізмів in vivo, якщо не потрібно деталізувати конкретні структури.

-Ідеально виділити капсулу або стінку мікроорганізмів.

Перевага

-Демні польові мікроскопи із заломлюючим конденсатором дешевші.

-Використання його дуже корисно при збільшенні в 40 разів.

-Ідеально підходять для спостереження зразків, які мають показник заломлення, подібний до середовища, де вони виявлені. Наприклад, клітини культури, дріжджових або рухливих бактерій, такі як спірохети (Borrelias, Leptospiras і Treponemas).

-Клітину можна спостерігати in vivo, що дозволяє оцінити її поведінку. Наприклад, броунівський рух, рух джгутиками, рух за допомогою викиду псевдопод, процес мітотичного поділу, вилуплення личинок, розпускання дріжджів, фагоцитоз тощо.

-Дозволяє виділити краї структур, наприклад капсулу та клітинну стінку.

-Можливо проаналізувати розрізнені частинки.

-Використовувати барвники не потрібно.

Недоліки

-Особливо слід бути обережним при монтажі препаратів, оскільки якщо вони занадто товсті, це не буде добре спостерігатися.

-Різолюваність зображень низька.

-Місцеві польові мікроскопи, які використовують заломлюючі конденсатори, мають дуже низький відсоток освітленості.

-Для покращення якості зображення за допомогою занурення (100X) необхідно зменшити числову діафрагму цілей і, таким чином, збільшити якість конуса, що висвітлює. Для цього важливим є включення додаткової діафрагми, яка може регулювати числову діафрагму об'єктива.

-Ви не можете візуалізувати сухі препарати або кольорові препарати, якщо вони не є життєво важливими барвниками.

-Не допускає візуалізації певних структур, особливо внутрішніх.

-Демні польові мікроскопи дорожчі.

Список літератури

1. "Мікроскоп темного поля". Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 26 серпня 2018, 00:18 UTC. 30 червня 2019, 01:06
2. Агудело Р, Рестрепо М, Морено Н. Діагностика лептоспірозу з проб крові та культури шляхом спостереження під мікроскопом темного поля. Біомедичні. 2008 р .; 28 (1): 7-9. Доступно з: scielo.org
3. Родрігес Ф. Типи оптичних мікроскопів. Блог клінічної та біомедичної лабораторії. Доступно за адресою: franrzmn.com
4. Автори Вікіпедії Мікроскопія темного поля. Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 19 жовтня 2018 р., 00:13 UTC. Доступно за адресою: wikipedia.org
5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. Оцінка мікроскопії темного поля, культури та комерційних серологічних наборів у діагностиці лептоспірозу. Індійський J Med Microbiol. 2015 рік; 33 (3): 416-21. Доступно у: nlm.nih.gov