- Склад зануреного масла
- Характеристики масляного занурення
- Основи занурення олії
- Використання або застосування
- Кроки для спостереження за препаратом з використанням зануреного масла
- Догляд
- Список літератури
Занурення масло являє собою в'язку прозору рідину , що має високий показник заломлення. З цієї причини він широко використовується в мікроскопічних спостереженнях, оскільки забезпечує властивість концентрувати світло при проходженні через 100X ціль мікроскопа, збільшуючи його роздільну здатність.
Це відбувається через утворення в'язкої плівки між об'єктивом та мазком, запобігаючи розсіюванню світлових променів, коли вони досягають повітря, концентруючи таким чином світлові промені у бік зразка.
Крапельниця з масляним зануренням та мікроскоп орієнтована з об'єктом 100х за допомогою масляного занурення. Джерело: Pixabay.com
Масло занурення використовується лише з метою 100X. Ось чому мета 100X також називається об'єктом занурення. Решта відомі як сухі мішені. Цю лінзу неможливо використовувати без занурення, оскільки без неї візуалізація не була б задовільною.
Основна функція занурювального масла полягає в наданні більш чітких, чітких і чітких зображень, що дозволяють спостерігати деталі, що з іншими лінзами було б неможливо.
Першим маслом, яке було використано для цієї мети, було анісове масло, яке було використано разом із першою лінзою занурення, створеною Джованні Баттіста Амічі. Це лише запобігало хроматичній аберації, але не збільшувало числову діафрагму лінзової системи.
Тоді використовували кедрове масло, але воно мало багато недоліків, які змусили його використовувати. Серед них була її висока кислотність, яка завдала шкоди цілям у короткий термін.
Згодом інші речовини, такі як вода та гліцерин, були використані до тих пір, поки не були створені синтетичні занурювальні олії, які потроху були очищені, поки вони не дійшли до поточного зануреного масла, яке є складною сполукою органічних речовин.
Склад зануреного масла
Масло для занурення складається з суміші органічних сполук, таких як: терфеніл, гідрований терфеніл, природні вуглеводні та полібутени.
Характеристики масляного занурення
Масло для занурення - це світло-жовта рідина, злегка в’язка на вигляд, з характерним запахом і щільністю від 0,92 до 0,99 г / см 3 .
Масло занурення не розчиняється у воді і має температуру кипіння 340 ° С. Показник заломлення a (n 20 ° C / D): коливається від 1,448 до 1,516. Тим часом показник спалаху становить 110 ° C, а в'язкість коливається від 100 до 120 мПа.с.
Цей продукт необхідно утилізувати належним чином, оскільки він є екотоксичним. Іншими словами, це шкідливо для навколишнього середовища, в основному впливає на водних тварин. З іншого боку, це подразнює шкіру та слизові оболонки. При попаданні всередину він нефротоксичний і кардіотоксичний.
Масло для занурення стабільне при температурі від 15 до 25 ° C, температура, при якій його потрібно зберігати.
Основи занурення олії
При використанні лінз з більшим збільшенням слід збільшувати інтенсивність світла. Однак багато світлових променів втрачаються через те, що вони розсіюються при досягненні повітря (простір між покривом і лінзою), і навіть деякі промені повністю відбиваються.
Масло занурення має показник заломлення, аналогічний склу. Тому, коли масло контактує між лінзою 100X та кришкою, світлові промені концентруються.
Концентровані промені проходять через зразок і різко знімають зображення, тобто збільшують числову діафрагму об'єктива та коректують хроматичні та сферичні відхилення.
Використання або застосування
Використання занурювального масла особливо необхідне, коли потрібно спостерігати за зображенням ширше, використовуючи найвищу мету збільшення (об'єкт 100X), щоб побачити деталі, які мають важливе значення для встановлення діагнозу.
Тому його широко використовують у мікроскопічних дослідженнях у різних областях, таких як: гістологія, цитологія, гематологія та бактеріологія. Наприклад, це корисно для вивчення особливостей клітин і тканин пацієнта.
Він також використовується для аналізу мазків крові, де ми хочемо деталізувати характеристики гемопаразитів всередині і зовні еритроцитів, а також у препаратах Грама, щоб визначити морфотинторіальні характеристики мікроорганізмів.
Зазвичай його використовують у фіксованих препаратах, оскільки не рекомендується в свіжих препаратах. Це пояснюється тим, що поверхневий натяг олії змушує ковзання рухатися, внаслідок чого зразок зміщується під час спостереження та перешкоджає аналізу.
З іншого боку, занурювальна олія корисна не лише у звичайній світловій мікроскопії: вона також використовується у мікроскопах тотальної флуоресценції внутрішнього відбиття (TIRFM) та в конфокальних флуоресцентних програмах.
Кроки для спостереження за препаратом з використанням зануреного масла
Для перегляду слайда під мікроскопом спочатку слайд слід сфокусувати за допомогою мети найменшого збільшення, зазвичай 10X, із низькою інтенсивністю світла.
Потім він переходить до цілі 40X, і світловий шлях трохи збільшується. Деякі аналізи можуть бути виконані при цьому збільшенні, але 100-кратне збільшення потрібно, щоб побачити структурні деталі.
Перед тим, як перейти до цілі 100X, крапля зануреного масла поміщається на покривало, саме там, де ви хочете спостерігати, а потім башточку мікроскопа переміщують, щоб знайти 100-кратну мету в препараті.
Інтенсивність світла регулюється (збільшується) (переміщуючи конденсатор і відкриваючи діафрагму). Потім за допомогою декількох невеликих рухів гвинта мікрометра (вперед або назад) він повинен ідеально фокусуватися, якщо мікроскоп використовує парафокальні цілі.
Якщо ви спробуєте сконцентрувати препарат безпосередньо занурювальною лінзою, у вас можуть виникнути проблеми з пошуку фокусу. Це не неможлива дія, але складність значно збільшується.
Догляд
Щоб використовувати масло для занурення, необхідно враховувати певні умови.
Після виготовлення кольорового препарату, такого як мазок, пофарбований Giemsa або Gram, зачекайте, поки мазок повністю висохне, перед тим як нанести масло. В іншому випадку олія разом з водою утворить міцели, які не дозволять препарату побачити.
З іншого боку, після спостереження за партією препаратів, тобто наприкінці робочого дня, об'єкт 100X повинен бути ретельно очищений, використовуючи лінзовий папір з етанолом. Якщо лінза залишиться брудною, масло на ній висохне і тоді її буде дуже важко видалити, пошкодивши поле зору.
Так само слід враховувати, що масло є горючим і його слід зберігати подалі від джерел тепла (запальничок). Важливо уникати нагрівання вище 65 ° С.
Нарешті, олія є токсичним продуктом. Тому слід уникати прямого контакту зі шкірою та слизовими оболонками, де це може викликати незначне роздратування. Щоб уникнути нещасних випадків, для цього рекомендується використовувати рукавички та захисні окуляри.
У разі контакту з маслом ділянку слід промити великою кількістю води. Якщо олія бризкає в очі, його слід змити таким же чином, зберігаючи очі відкритими. У разі випадкового прийому всередину, важливо поглинути теплу воду і викликати блювоту, крім того, щоб звернутися до найближчого лікаря.
Список літератури
- "Повний мікроскоп флуоресценції внутрішнього відбиття". Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 30 грудня 2018, 22:46 UTC. 14 травня 2019 р., 01:54
- IVD. Мікроскопія занурення масла. Доступно за адресою: Користувачі / Команда / Завантаження.
- Екологічна біологія та мікробіологія. Функціонування оптичного мікроскопа. Доступно за адресою: eumed.net/libros.
- Санчес Лера Ріта Марія, Оліва Гарсія Нінфа Роза. Історія мікроскопа та його вплив на мікробіологію. Rev Hum Med, 2015; 15 (2): 355-372. Доступно на: scielo.
- Ерреро Дж. Практика № 1: Основи та використання загального сполучного оптичного мікроскопа. Universitat d´Alacant Доступний за адресою: rua.ua.es/dspace
- Шарлау - MSDS. Масло для занурення, для мікроскопії. 2001. Доступний за адресою: insumos-labcentral.