АГАРИН МАККЕЙКІ: ОБГРУНТУВАННЯ, ПІДГОТОВКА ТА ВИКОРИСТАННЯ - БІОЛОГІЯ - 2025

МакКонкі агар являє собою твердий носій , який дозволяє виняткову ізоляцію грамнегативнихбактерій. З цієї причини воно є селективним середовищем, а також дозволяє розрізняти лактозну ферментацію та неферментуючі бацили, що робить її диференційованим середовищем. Це одне з найбільш широко використовуваних культурних середовищ в лабораторії мікробіології.

Це середовище в основному використовується для виділення грамнегативних бацил, що належать до сімейства Enterobacteriaceae, включаючи умовно-патогенні та ентеропатогенні види.

Насіння агару МакКонкі засівають двома видами бактерій. Ліві бічні колонії ферментації лактози, праві бічні колонії безлактозного бродіння.

Він також може бути використаний для виділення інших кишкових бацил, які мешкають в шлунково-кишковому тракті, але не належать до Enterobacteriaceae, таких як Aeromonas sp, Plesiomonas sp, серед інших.

Нарешті, він може виділити інші грамнегативні бацили, які не ферментують глюкозою, які містяться у навколишньому середовищі, воді чи ґрунтах, але іноді це можуть бути умовно-патогенні патогени, такі як Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, серед інших.

Основа

Агар MacConkey

Основу цього середовища можна пояснити описом його компонентів, оскільки кожен має мету, яка визначає його властивість.

Жовчні солі та кристал фіалки

У цьому сенсі агар MacConkey має складний склад. Перш за все, він містить жовчні солі та кришталеву фіалку.

Ці елементи відповідають за інгібування росту грампозитивних бактерій та деяких влучних грамнегативних бацил. У свою чергу, це сприяє виробленню грамнегативних бацил, на які ці речовини не впливають. Тому це вибіркове середовище.

Кажуть, що вона є дещо вибірковою порівняно з іншими середовищами, які також пригнічують ріст грампозитивних бактерій, а також більшості грамнегативних бактерій.

Пептони, поліпектони та лактоза

Він містить речовини, які забезпечують необхідні поживні речовини мікроорганізмам, які розвиваються в цьому середовищі, таких як пептони, поліпектони та лактоза.

Лактоза є ключовим моментом для того, щоб середовище було диференційованим середовищем, оскільки мікроорганізми, здатні ферментувати лактозу, розвиватимуть сильні рожеві колонії.

Деякі бактерії можуть бродити лактозу повільно або слабко, розвиваючи блідо-рожеві колонії і залишаючись лактозопозитивними.

Ті, хто не ферментує лактозу, використовують пептони як джерело енергії, виробляючи аміак, підщеплюючи середовище. З цієї причини колонії, що виникають, є безбарвними або прозорими.

Індикатор PH

Зміна кольору досягається завдяки іншому необхідному складу, який має агар MacConkey. Ця сполука є показником pH, який у даному випадку є нейтральним червоним.

Ферментація лактози призводить до отримання змішаних кислот. Вони підкисляють середовище до рН нижче 6,8.

Це призводить до того, що показник рН перетворюється на глибокий рожевий відтінок. Інтенсивність кольору може змінюватися залежно від кінцевого рН.

Дистильована вода, хлорид натрію та агар

З іншого боку, він містить дистильовану воду та хлорид натрію, які забезпечують гідратацію середовища та осмотичний баланс. Нарешті, середовище містить агар, який є основою, що забезпечує консистенцію твердого середовища.

Підготовлене агарове середовище MacConkey повинно мати кінцевий pH, відрегульований до 7,1 ± 0,2.

Підготовка

На один літр агару MacConkey 50 г зневодненого середовища необхідно зважити, потім помістити в колбу і розчинити в одному літрі дистильованої води. Після 10 хвилин стояння його нагрівають, постійно перемішуючи до кипіння протягом 1 хвилини.

Потім колбу поміщають в автоклав і стерилізують при 121 ° С протягом 20 хвилин. Після закінчення часу його виймають з автоклава і дають йому охолонути до досягнення температури 45 ° С, щоб потім подавати в стерильний чашки Петрі всередині ламінарного витяжки або перед конфоркою Бунзена.

Дайте затвердіти і зберігайте в перевернутому тримачі тарілки і зберігайте в холодильнику при температурі 2-8 ° C до використання.

Для одержання агару MacConkey, який пригнічує ефект припливання, що виробляється родом Proteus, використовується низькосолоний агар MacConkey.

Використання звичайного агару MacConkey

MacConkey Agar включений у всі набори для культуральних середовищ, організовані для посіву клінічних проб, отриманих у лабораторії. Він також корисний у харчовій мікробіології та мікробіології навколишнього середовища.

Різноманітність грамнегативних стрижнів, що ростуть у цій середовищі, виражає фенотипічні характеристики, які допомагають поставити припущенний діагноз щодо відповідного виду. Наприклад, розмір, колір, консистенція та запах колоній - це деякі характеристики, якими можна керувати.

У цьому середовищі види Escherichia coli, Klebsiella sp та Enterobacter sp утворюють сильні рожеві колонії, оточені зоною осадженої жовчі.

Тоді як бактерії, такі як Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp і Hafnia sp, можуть виявитися безбарвними через 24 години або блідо-рожевими протягом 24 -48 годин.

Так само роди Proteus, Edwadsiella, Salmonella і Shigella утворюють безбарвні або прозорі колонії.

Інші варіанти агару MacConkey

Є й інші варіанти MacConkey Agar, які мають конкретні цілі. Вони згадуються нижче:

Агар МакКонкі з сорбітом

Це середовище було розроблено для того, щоб відрізняти ентеропатогенний штам (ентерогеморагічний Escherichia coli O157: H7) від решти штамів кишкової палички.

Це середовище обмінює вуглеводну лактозу на сорбіт. Ентерогеморагічні штами E. coli O157: H7 відрізняються від решти тим, що не ферментують сорбіт і тому отримують прозорі колонії, тоді як решта штамів E. coli ферментують сорбіт, а колонії - сильно рожевими.

Агар макКонкі без кришталевої фіалки, ні солі

Цей агар сильно відрізняється від класичного агару MacConkey, оскільки не має фіолетового кристала і можуть розвиватися грампозитивні бактерії.

З іншого боку, відсутність солі гальмує появу рою на агарі, виробленому деякими ентеричними бацилами, такими як рід Proteus, і тим самим полегшує виділення всіх присутніх бактерій, включаючи грампозитивні бактерії.

Агар MacConkey з цефоперазоном

Цей варіант агару MacConkey був розроблений для початкової ізоляції Laribacter hongkongensis, а згодом виявився корисним для виділення Arcobacter butzleri. Обидва злегка зігнуті грамнегативними стрижнями, стійкими до цефоперазону.

Ці бактерії нещодавно були пов'язані з спричиненням гастроентериту та діареї у азіатських та європейських людей, які стали двома потужними збудниками хвороб.

Антибіотик дозволяє пригнічувати супутню флору шлунково-кишкового тракту, що сприяє розвитку цих бактерій, не даючи їм пройти непомітно, оскільки для вирощування їм потрібно 72 години.

Агар MacConkey, приготовлений з морською водою при 10% об / об

Цей варіант корисний для оцінки бактеріальних санітарних показників фекальних забруднень, включаючи загальні коліформи та калові коліформи у рекреаційних солоних водах (пляжі та затоки).

Кортес та ін в 2013 році продемонстрували, що підготовлена ​​таким чином середовище значно збільшує відновлення цих мікроорганізмів у сольовому середовищі порівняно з використанням агару МакКонкі, приготованого з дистильованою водою.

Це пов’язано з тим, що модифіковане середовище стимулює ріст бактерій, які фізіологічно перебувають у стані затримки, "життєздатні, але не культивовані", тому вони не підлягають відновленню у звичайних середовищах.

Список літератури

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT та ін. Використання цефоперазону агар MacConkey для селективної ізоляції Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003 р .; 41 (10): 4839-41.
2. Агар MacConkey. Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 4 квітня 2018, 18:16 UTC 29 грудня 2018, 15:22 en.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Мікробіологічна діагностика Бейлі та Скотта. 12 ред. Аргентина. Редакція Panamericana SA
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Мікробіологічна діагностика. (5-е видання). Аргентина, редакція Panamericana SA
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Вплив засобів масової культури, підготовлених з морською водою, на показники здоров'я в морських водах курортів у Чичирівіче, штат Фалькон, Венесуела. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Практична клінічна мікробіологія. Кадізький університет, 2-е видання. Служба публікацій UCA.