ХАРЧОВИЙ АГАР: ОБГРУНТУВАННЯ, ПІДГОТОВКА ТА ВИКОРИСТАННЯ - БІОЛОГІЯ - 2025

Поживний агар є неселективной середовищем і не диференціальної твердої культури. У цьому середовищі ростуть усі види бактерій, які не вимагають з поживної точки зору.

Це просте середовище, і, незважаючи на свою назву, містить меншу поживну цінність порівняно з іншими подібними засобами, такими як мозковий інфузійний агар або триптиказа соєвий агар.

Колонія розраховує на поживний агар

Його корисність в лабораторії дуже різноманітна. В основному він використовується для субкультури видів, підтримання штамів, підрахунку колоній, як основи для підготовки агару крові, серед інших.

Так само завдяки своєму світло-бежевому забарвленню винятково можна виділити виробництво пігментів, що утворюються деякими бактеріальними штамами, наприклад, зеленуватий пігмент Pseudomonas aeruginosa, цегляно-червоний пігмент, що утворюється при кімнатній температурі Serratia marcescens, золотисто-жовтий пігмент Staphylococcus aureus, серед інших.

Крім того, це одне з найдешевших зростаючих засобів масової інформації, що зустрічаються на ринку.

Основа

Як вже було сказано вище, це дуже просте середовище, яке покладається на забезпечення поживними речовинами для росту бактерій без обмежень і без складних реакцій для їх інтерпретації.

Оскільки середовище є напівпрозорою, воно ідеально підходить для підрахунку колоній методом глибинного висіву.

Склад

Він складається, головним чином, з м'ясного або дріжджового екстракту, пептонів або желатинового панкреатичного дайджесту, агар-агару, хлориду натрію та дистильованої води.

М'ясний або дріжджовий екстракт і пептони є основними джерелами вуглецю і мінералів (азот, фосфор і сірка), які будуть використовуватися бактеріями як джерело енергії та фактори росту.

Аналогічно, агар-агар є основою всіх твердих культурних середовищ, що прийшли на зміну желатину, що було першим базовим з'єднанням, яке використовував Роберт Кох для надання міцної консистенції його носіям.

Агар - полісахарид, що складається з галактози, галактоманана, агарози та агаропектину. Він встановлюється при 40 ° C і плавиться близько 100 ° C.

Зі свого боку, хлорид натрію забезпечує середовище осмолярністю, необхідною для розвитку бактерій.

Нарешті, вода служить для гідратації та розчинення ліофілізованих сполук. Слід використовувати дистильовану воду, налаштовану на нейтральний pH. Вода з крана не повинна використовуватися, оскільки вона містить кальцій і магній, які можуть вступати в реакцію з фосфатами в середовищі і утворювати нерозчинні солі.

Підготовка

На один літр поживного агару необхідно зважити 31 г зневодненого середовища. Помістіть його в колбу і розведіть в літрі дистильованої води. Після 5 хвилин стояння нагрійте джерело тепла і постійно перемішуйте до кипіння протягом 1 або 2 хвилин.

Підготовка культурального середовища.

Потім колбу поміщають в автоклав і стерилізують при 121 ° С протягом 20 хвилин.

Стерилізація в автоклаві

Після закінчення часу його виймають з автоклава і подають у стерильний чашки Петрі, використовуючи кришку з ламінарним потоком або конфорку Бунзена.

Якщо чашки Петрі одноразові (пластикові), то середовище необхідно розподілити, коли температура агару становить приблизно 50 ° C, щоб запобігти їх деформації через надмірне нагрівання.

Дайте затвердіти і зберігайте на перевернутому тримачі тарілки і зберігайте при температурі 2-8 ° C до використання.

Пластини повинні бути загартовані перед посівом. Пластини з живильним агаром не слід використовувати, якщо вони забруднені або зневоднені.

РН підготовленого середовища повинен бути відрегульований до 7,3 ± 0,2.

Програми

Це найпростіша культуральна середовище, що використовується в лабораторії мікробіології. Його склад відмінно підходить для росту невимогливих бактерій.

Основні напрямки використання пояснюються нижче:

В якості основи для приготування агару крові

Цей засіб іноді використовується як основа для приготування агару крові, однак це не є найбільш часто використовуваною основою.

Стимулюють спороношення спороутворюючих бактерій

Це культуральне середовище особливо корисно для стимулювання спороношення спороутворюючих бактерій, таких як Bacillus sp.

Для цього штам роду Bacillus висівають та інкубують протягом 24 годин при температурі 37 ° C при аеробіозі. Після того, як колонії виростають, плиту піддають температурному напруженню, тобто температуру духовки збільшують до 44 ° C і залишають на наступні 24 години або поміщають у холодильник на 24 години.

Після закінчення часу мазки культури роблять і фарбують плямою Грама або плямою від спори Шеффера-Фултона. У них будуть спостерігатися бацили з ендоспорами (спорами всередині бацили) та екзоспорами (спорами поза бацили).

Технічне обслуговування

Деякі дослідницькі або університетські лабораторії підтримки викладання потребують збереження життєздатних бактерій клінічного значення якомога довше, щоб використовувати банк бактерій (бактеріотека) для науково-дослідної роботи або для підготовки навчальної практики, коли Студенти навчаться маніпулювати та ідентифікувати ці мікроорганізми.

Для цього можна використовувати живильний агар, а також агар для інфузії мозку. Агар готують, розливають у пробірки з бакелітовою кришкою і нахиляють на основу таким чином, що агар твердне, утворюючи на дні блок і скос на поверхні (дзьоб флейти).

На кожній пробірці позначено найменування бактерій, які будуть висівати, та дату. Кожну з бактерій висіватимуть на скоси та інкубувати протягом 24 год. Після того, як колонії виростуть, пробірки зберігають при кімнатній температурі.

Бактеріотека повинна поновлюватися від 1 до 3 місяців, щоб уникнути забруднення та зневоднення середовища, а також загибелі бактерій.

У такий спосіб можна підтримувати лише некипкі бактерії.

Колонія кол

Хоча існують спеціалізовані засоби для підрахунку колоній, такі як стандартний лічильний агар, поживний агар може бути використаний для цієї мети як поверхневим висівом дригальською шпателем, так і глибиною. З цієї причини це дуже корисно при мікробіологічному аналізі їжі та води.

Запуск діагностичних тестів

Оскільки це середовище, яка не містить крові чи будь-яких інших добавок, ідеально підходить для взяття на цьому середовищі колоній для проведення тесту на каталазу.

Так само, завдяки своєму світлому кольору, показано проводити тести на оксидазу безпосередньо на ділянці посіяного агару без втручання.

Відновлення мезофільних аеробів з рекреаційних солоних вод (пляжі)

Поживний агар, приготовлений з 10% морської води, корисний для оцінки мезофільних аеробів у пляжних водах.

Таким чином, можна оцінити реальний рівень забруднення, який води мають ці мікроорганізми, оскільки в даному типі зразків результати перекриваються при використанні культурних середовищ, приготованих звичайним способом.

Це продемонстрували Cortez та ін. у 2013 році в науково-дослідній роботі.

Це можна пояснити через різку зміну, яку зазнають бактерії при переході з гіперсоленого середовища в малосолене середовище, тому мікроорганізми вступають у стан млявості, в якому вони життєздатні, але не піддаються культивуванню.

Список літератури

1. "Поживний агар". Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 13 вересня 2016, 20:33 UTC. 29 грудня 2018, 21:04 en.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Мікробіологічна діагностика Бейлі та Скотта. 12 ред. Аргентина. Редакція Panamericana SA
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Мікробіологічна діагностика. (5-е видання). Аргентина, редакція Panamericana SA
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Вплив засобів масової культури, підготовлених з морською водою, на показники здоров'я в морських водах курортів у Чичирівіче, штат Фалькон, Венесуела. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M та Cardoso M. Мікробіологічна якість води для осіменіння, для свиней. Cient.Agro.Amaz. 2013 рік; 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Практична клінічна мікробіологія. Кадізький університет, 2-е видання. Служба публікацій UCA.