ЛАКТОФЕНОЛОВИЙ СИНІЙ: ХАРАКТЕРИСТИКИ, СКЛАД, ПРЕПАРАТ, ЗАСТОСУВАННЯ - ХІМІЯ - 2025

Lactophenol синій або блакитний бавовна отримують з одиничними властивостями барвника. Він використовується в клінічних лабораторіях для забарвлення в основному грибкових структур, таких як гіфи, зародкові трубки та спори.

Це допомагає при передбачуваній або попередній діагностиці певних грибів, проте завжди доцільно підкріпити діагноз більш конкретними тестами, такими як біохімічні або серологічні тести.

Графічне зображення плями лактофенолового синього, мазок, забарвлений лактофеноловим синім, препарат, встановлений на мікроскопі. Джерело: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Лактофенол блакитний складається з молочної кислоти, анілінового синього, гліцерину, фенолу та деіонізованої води. Його можна приготувати в лабораторії або придбати готовий до вживання. Після того як він буде готовий до вживання, ні в якому разі не слід його розбавляти, оскільки ця дія дасть жахливі результати.

Концентрація його компонентів робить його ідеальним для фарбування грибкових структур, оскільки фенол усуває супутню мікробіоти бактерій, а молочна кислота створює захисну плівку навколо грибкової структури. Нарешті, аніліновий блакитний має спорідненість до прилягання до структур гриба.

Основа

За допомогою лактофенолового синього проводиться просте фарбування грибкових структур певної мікологічної культури. Його називають простим, оскільки він використовує лише один барвник.

Лактофеноловий синій, крім фарбування, також виступає в якості освітлювача зразка, завдяки спільній дії молочної кислоти та фенолу, крім того, фенол поводиться як збудник і водночас запобігає лізису мікроорганізму, пригнічуючи гідролітичні ферменти, які може бути присутнім.

У той час як молочна кислота зберігає морфологію структур гриба.

З іншого боку, аніліновий синій має властивість прилипати або зв'язуватися з структурами, що містять хітин. Споруди забарвлені в світло-блакитний колір.

Слід зазначити, що клітинна стінка грибкових мікроорганізмів, особливо цвілі, містить хітин, саме тому цей барвник ідеально підходить для фарбування цих мікроорганізмів.

характеристики

Розчин лактофенолового синього - сильнокислий, злегка каламутний водний барвник зі світло-блакитним кольором. Він залишається стабільним, якщо зберігається при температурі від 15 ° C до 25 ° C. Пляшку потрібно тримати належним чином закритою. Це дратівливо і агресивно впливає на шкіру та слизові оболонки.

Склад

Формула приготування одного літра лактофенолового синього полягає в наступному:

-250 г / л молочної кислоти

-1,0 г / л анілінового синього або метило-синього

-500 г / л гліцерину

-250 г / л фенолу

-250 мл деіонізованої або дистильованої води.

Фенол розчиняють у раніше прогрітій воді. Молочну кислоту та гліцерин додають і дуже добре перемішують. Нарешті, аніліновий синій розчиняється. Він знову перемішується і готовий до вживання.

Порції для приготування 80 мл розчину лактофенолу синього:

-20 г кристалів фенолу

-20 мл молочної кислоти

-40 мл гліцерину або гліцерину

-20 мл дистильованої води.

Використовуйте

Він використовується для фарбування грибкових структур і за допомогою морфологічних характеристик, що спостерігаються на мікроскопічному рівні, для того, щоб можна було встановити припущенний діагноз гриба.

Процес

Фарбування грибкових структур культур

- Візьміть чисту культуру гриба, структури якого слід спостерігати.

- Переважно працюйте в кришці для ламінарного потоку або під запальничкою, використовуючи маску та рукавички, оскільки необхідно дотримуватися стандартів біобезпеки, оскільки більшість форм легко поширюються в навколишньому середовищі і тому представляють небезпеку для оператора.

- Крапля лактофенолового синього кладеться на предметне скло.

- Виріжте невеликий квадрат хорошої якісної скотчу і дуже обережно приклейте його до кінця холодної стерилізованої ручки з платини.

- Платинова ручка наближається до найбільш поверхневої частини грибкової колонії, і культуру чіпляють дуже обережно, саме там, де знаходиться клейка стрічка.

- Потім його беруть до гірки і кладуть прямо на краплю лактофенолового синього, дбаючи про те, щоб стрічка ідеально витягнута і змащена барвником. Платинова ручка дуже делікатно знімається.

- Ще одна крапля лактофенолового синього розміщується на стрічці, а зверху покривала. Не чиніть занадто сильний тиск, щоб не зруйнувати структури гриба, оскільки вони надзвичайно крихкі. Барвнику потрібно дати діяти приблизно від 3 до 4 хвилин.

- Після закінчення цього часу препарат готовий спостерігати під мікроскопом у 10-кратне або 40-кратне збільшення. Якщо потрібно 100X спостереження, слід використовувати масло занурення.

- Структури гриба, як правило, забарвлюються в синій колір, за винятком молодих грибів, які збережуть своє характерне коричневе забарвлення цього типу грибів.

Пряме біологічне фарбування зразка

Якщо потрібно вивчити пряму біологічну пробу, таку як мокрота, гній, ексудати, виділення, серед інших, вони повинні мати попередню процедуру дезактивації зразка. Для цього використовують розчин NaOH.

У випадку зразків волосся їх можна фарбувати безпосередньо.

Кілька уражених волосків (усього 10) беруть із передбачуваних уражень тинеї-капіту (алопецькі ділянки) та розміщують на предметній ковзці (3 - 4 волоски на слайд). Кілька крапель лактофенолового синього кладуть зверху і негайно накривають покривом.

Візьміть гірку за допомогою щипців і обережно нагрійте пальник. Для цього зробіть 3 - 4 швидких проходу крізь полум'я. Поспостерігайте за мікроскопом при 40X і шукайте спори зовні або всередині волосся (ектотрикс або ендотрикс відповідно). При необхідності додайте масло для занурення і спостерігайте при 100X.

Фарбування зародкової трубки в ідентифікації

Після інкубації припущенної культури Candida albicans в сироватці людини протягом 2 - 4 годин при температурі 37 ° С відбирають порцію розчину і фарбують лактофеноловим синім. Препарат спостерігають під мікроскопом при 40Х. Зародкова трубка присутня і бластоспори забарвлюються в яскраво-синій колір.

Лист даних про безпеку лактофенолу

Національна асоціація протипожежного захисту (NFPA) встановлює таблицю даних щодо безпеки хімічних речовин з точки зору ризику, який він представляє за різними аспектами; вони символізуються кольоровим ромбом і числом, що становить від 0- Четверо.

Небезпеки для здоров'я ідентифікуються синім кольором, займистістю червоного кольору, нестабільністю чи реактивністю жовтого кольору, а будь-яку особливу небезпеку - білим кольором.

Здоров'я

Ризик для здоров’я, який представляє лактофеноловий синій відповідно до НФПА, є рівнем 3. Це означає, що ця речовина надзвичайно небезпечна при попаданні всередину або при прямому контакті зі шкірою або слизовою оболонкою.

Це сильно агресивна і дратівлива речовина.

При попаданні на шкіру та слизові оболонки це викликає сильні опіки.

При прийомі всередину це може призвести до головного болю, плутанини, млявості, непритомності, зупинки дихання і навіть смерті.

Запалюваність

За даними NFPA, лактофенол синій оцінюється рівнем 1 за горючістю. Це означає, що він горить лише при нагріванні вище 94 ° C.

Нестабільність

Перераховано згідно з NFPA на рівні 0 (нуль) з точки зору реактивності. Це означає, що він не має ризику реактивності, тобто є хімічно стійкою речовиною.

Особливі небезпеки

Він не пропонує додаткових особливих небезпек.

Список літератури

1. SAR Laboratory. Лактофенол блакитний. 2010. Доступно за адресою: labsar.com.
2. Прикладна лабораторія клінічної хімії. Лактофенол синій. 2015. Доступний за адресою: cromakit.es
3. Merck Laboratories. Мікроскопія лактофенолового синього в розчині. 2017. Доступний за адресою: Користувачі / Equipo / Завантаження
4. Карта екстреної допомоги Розчин лактофенолового синього для грибкового фарбування. Universidad Pontificia Javeriana, Богота, Колумбія. 2014. Доступний за адресою: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Техніка фарбування грибкових структур рослинними барвниками як альтернатива, що не забруднює. Біоагро, 2011; 23 (1): 65-68. Доступний за адресою: Redalyc.
6. Лабораторна мультимедіа. Лактофенол бавовна синій. 2017. Доступно з: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Actor J, Dasgupta A. Біохімічні випробування та методи фарбування мікробної ідентифікації. Science Direct, 2017; 61-73. Доступно від: Elsevier