КУЛЬТУРА КРОВІ: ДЛЯ ЧОГО ЦЕ, ОБҐРУНТУВАННЯ, ПРОЦЕДУРА, РЕЗУЛЬТАТИ - БІОЛОГІЯ - 2025

Культура крові є бактеріологічним дослідженням , яке прагне виявити присутність мікроорганізмів в крові. Кров за своєю природою є стерильною рідиною і тому її необхідно зберігати у фізіологічних умовах, тому наявність у крові бактерій чи грибів завжди патологічна.

Коли в крові виявляються бактерії або грибки, але розмноження не перевищує елімінацію мікроорганізмів імунною системою, це називається бактеріємія (для бактерій) або грибком (для грибів); Але якщо мікроорганізми в кількості збільшуються неконтрольовано, це називається септицемією.

Пляшки з культурою крові (жовтий: дитячий аеробіоз, зелений: аеробіоз у дорослих, і червоний: анаеробіоз у дорослих). Джерело: фотографія, зроблена автором магістра Маріельси Гіл.

Бактеремія, грибкова хвороба та септицемія загрожують життю пацієнта, тому необхідно негайно лікуватись. Ось чому, коли є підозра на зараження в крові, лікарі вимагають дослідження культури крові.

Цей бактеріологічний аналіз дозволяє дізнатися, чи є в крові інфекція, чи є мікроорганізм. Крім того, якщо вона позитивна, проводиться тест на чутливість, щоб знати, який антибіотик чи протигрибковий препарат можна використовувати в лікуванні.

Якщо, з іншого боку, культура крові негативна через 24 години інкубації, її не слід відкидати, поки вона не стане негативною протягом 240 годин. Це забезпечує відсутність повільно зростаючих мікроорганізмів.

Щоб культура крові була надійною, необхідно приймати екстремальні асептичні заходи під час взяття проби, а для підвищення надійності та чутливості тесту необхідно взяти мінімум два зразки під час піку лихоманки або поблизу неї.

Для чого це?

Кров - це стерильна рідина, і коли в ній виявляються мікроорганізми, вона є 100% патологічною. Ця ситуація являє собою дуже делікатну клінічну картину, яка компрометує життя пацієнта.

Культура крові - важливий бактеріологічний тест, який виявляє наявність мікроорганізмів у крові.

Мікроорганізми можуть потрапляти в кров різними шляхами, які можуть бути позасудинними інфекціями, такими як: пневмонія, внутрішньочеревна інфекція, пієлонефрит, серйозні інфекції шкіри, м’яких тканин або артрит.

Або також може бути внутрішньовенно, наприклад, забруднення внутрішньовенних або артеріальних катетерів, ендокардит, внутрішньовенна наркоманія, введення забруднених препаратів чи розчинів тощо.

Виявлення та лікування збудника сепсису вчасно має важливе значення для забезпечення виживання пацієнта.

У цьому сенсі лікар повинен вказати на реалізацію культури крові, коли він спостерігає ознаки та симптоми, які говорять про септицемію, такі як: лихоманка (вище 38 ° С) без явного інфекційного вогнища або, навпаки, переохолодження (<де 36 ° С).

Іншими ознаками можуть бути: озноб, збільшення кількості лейкоцитів (> 10 000 клітин / мм ³ ) або значне зниження поліморфноядерних клітин (<1000 ПМН / мм ³ ). Окрім поліпшеного поліпшення або втрати життєздатності раптово, серед інших попереджувальних ознак.

Бактеремія може бути постійною, минущою або переривчастою. Це важливо під час взяття проби, оскільки брати її потрібно тоді, коли більша ймовірність виявлення мікроорганізму циркулює.

Тому рекомендується брати принаймні 2 проби в різних місцях. Крім того, ідеальним є те, що проба береться у гарячкові піки або коли у пацієнта спостерігається тремтіння, екстремальне переохолодження, пітливість або тахікардія.

Однак, щоб культура крові була справді корисним засобом, пробу потрібно брати з особливою обережністю. Погана маніпуляція або поганий асепсис в момент взяття зразка може визнати недійсним тест, отримавши помилкові позитиви.

Основа

Дослідження складається з асептичного введення двох-трьох проб крові та розміщення її у спеціальних пляшках.

Спеціальні пристрої для культивування проб крові називають пляшками з культурою крові. Вони класифікуються на:

Відповідно до віку пацієнта

-Педіатричне використання

-Для дорослих.

За типом мікроорганізму

-Бляшки для аеробних мікроорганізмів (аеробні бактерії, факультативні бактерії та грибки).

-Пляшки з культурою крові для анаеробних мікроорганізмів (суворі анаеробні бактерії).

Деякі містять рідке культуральне середовище, а деякі містять тверде і рідке культуральне середовище одночасно. Вони також існують з частинками активованого вугілля.

Процес

Рекомендації щодо відбору проб

- Зразок для взяття висококваліфікованого та навченого персоналу в галузі мікробіології.

- Асепсис або ретельне очищення місця для збору проб, безперечно, є найважливішим кроком.

- Як і всі вибірки, медичний персонал повинен повністю виконувати заходи біобезпеки під час процесу (використання рукавичок, халату, окулярів, серед іншого).

- Подбайте про те, щоб були доступні всі необхідні знаряддя для взяття проб.

- Позначте флакони з повним іменем пацієнта, датою, номером медичної документації, часом збору проби та порядковим номером лабораторії.

-Ідеальним є взяття проби до того, як пацієнт розпочне антимікробну терапію. Вказується лише на випадок підозри на непрацююче лікування, яке проходить. У цьому випадку пробу слід брати до зміни препарату, використовуючи пляшки з культурою крові з інгібіторами антибіотиків (частинки активованого вугілля).

- Принаймні 2 зразки повинні бути взяті в різних анатомічних місцях, таких як права рука та ліва рука. При підозрі на ендокардит рекомендують 3 зразки. У кожну пробу будуть включені дві пляшки (одна для аеробіозу та одна для анаеробіозу).

Кількість зразка

Кількість зразка змінюється залежно від віку пацієнта, але відношення 1: 5 до 1:10 завжди слід підтримувати щодо розведення бульйону крові / культури.

У новонароджених рекомендована кількість проби становить 1 мл крові на флакон. Використовується дитяча пляшка.

У разі немовлят від одного місяця до одного року його можна збільшити до 1,5 мл крові на пляшку. Використовується дитяча пляшка.

У дітей старше 2 років відповідна кількість проби становить 2,5 мл крові на флакон. Використовується дитяча пляшка.

З підліткового віку його можна збільшити до об’єму крові між 5 - 10 мл на пляшку. Використовується пляшка для дорослих.

Нарешті, на стадії для дорослих необхідна кількість становить 8-10 мл на пляшку. Використовується пляшка для дорослих.

Відбір проб

- Зразок крові може бути венозним або артеріальним. Однак артеріальна кров береться лише тоді, коли венозний проб неможливий.

- Не рекомендується брати пробу з центрального венозного катетера, якщо:

1. Не можна брати пробу периферично (венозно або артеріально).
2. Пацієнти, що загрожують кровотечею.
3. Коли лікар підозрює бактеріємію через забруднення центрального венозного катетера.
4. Коли лихоманка з’являється після фебрильного припинення від 4 до 5 днів, незалежно від того, перебуває пацієнт на антимікробному лікуванні чи ні.

Асепсис перед відбором проб

- Виберіть анатомічні місця для відбору проб. В основному вибираються вени кращого калібру (базилікальна або цефальна вена).

- За даними Центрів контролю захворювань (CDC) в Атланті (США), оператор повинен мити руки 2% хлоргексидином або 10% повідоном йодом перед відбором проб, крім того, щоб носити рукавички.

-Пальпатуйте і знайдіть вену, яка буде використана.

-Очистити область проколу обертовим способом, роблячи рухи від центру назовні, використовуючи мильний хлоргексидин або антисептичне мило. Промити стерильним фізіологічним розчином.

Згодом нанесіть антисептик і дайте йому діяти. Приклад хлоргексидину глюконат 0,5% протягом 1 хвилини або повідон йоду 10% протягом 2 хвилин. Для останнього спочатку запитайте, чи є у пацієнта алергія на йод. Якщо у вас алергія, можна замінити 70% алкоголем.

Вилучення проби

- Покладіть джгут для посилення кровотоку і проростання вени.

- Не торкайтеся знову місця проколу пальцем. Якщо це вкрай необхідно, палець слід промити так само, як і область проколу.

-Вставте голку ін'єктора або шкіру голови у вену і витягніть необхідну кількість крові.

-Не кладіть ватку або марлю на голку при вийманні, якщо вона не стерильна.

-Усуньте захисну пломбу з пляшок дуже обережно і не торкаючись кришки. Деякі автори рекомендують провести дезінфекцію ковпачка перед щепленням зразка.

- Розподіліть відповідну кількість крові у флаконах. Якщо пробу беруть за допомогою інжектора, необхідну кількість спочатку заливають в анаеробну колбу, а потім у аеробну колбу. Якщо взяття робиться зі шкірою голови (метеликом), її виливають протилежно.

- Акуратно перемішайте флакон з культурою крові шляхом інверсії.

- Змініть рукавички і повторіть попередні кроки для збору другого зразка.

-Якщо другий зразок береться з іншого сайту, це можна зробити негайно, але якщо він з того самого сайту, потрібно почекати від однієї проби до іншої від 30 до 90 хвилин.

- Зразок необхідно віднести в лабораторію якнайшвидше, якщо це неможливо, його потрібно залишити при кімнатній температурі до 18 годин.

Культура

Потрапивши в лабораторію, колби інкубують при 37 ° С за умов кожної колби, тобто при аеробіозі та анаеробіозі відповідно.

Відповідно до ручного методу, дзвінок слід починати через 24 години інкубації, а потім дзвонити між добовими. Кільця виконуються наступним чином: спочатку ковпачок пляшки дезінфікують і вставляють голку стерильного інжектора. Рідина витягується з колби і висівається на кров’яний агар і шоколадний агар.

Якщо спостерігається ріст, проводиться грам, субкультури в специфічних середовищах, біохімічні тести та антибіограма.

В автоматизованих методах обладнання Bact / Alert видає сигнал тривоги, коли виявить, що флакон є позитивним. Таким же чином його слід нанести на кров’яний агар і шоколадний агар.

Інший метод, який набирає обертів, - це аналізувати колбу через 6 годин інкубації за допомогою мас-спектрометрії. Цей метод допоміг підвищити чутливість та швидкість діагностики.

Результати

Поки пляшка з культурою крові негативна, попередній проміжний звіт може бути наданий лікуючим лікарем. У звіті вказується, що він негативний у години, які він інкубував. Наприклад, якщо це стане негативним до четвертого дня, про нього повідомляється так:

Попередній результат: негативна культура в 96 годин інкубації.

Примітка: дослідження триває 240 годин.

Якщо культура крові позитивна, лікуючий лікар негайно повідомляється і надсилається звіт з принаймні грамом колонії. Приклад:

Попередній результат: у позитивній культурі за 48 годин інкубації спостерігаються грамнегативні бацили та негативна оксидаза. Проводиться тестування ідентифікації та чутливості.

Ця інформація спрямовує лікуючого лікаря розпочати емпіричну терапію щодо можливого мікроорганізму, очікуючи на остаточний результат лабораторії.

Після завершення бактеріологічного дослідження, тобто мікроорганізму було виявлено і антибіограма доступна, остаточний звіт слід надіслати якомога швидше.

Слід бути особливо обережним, якщо цільовим організмом є Neisseria gonorrhoeae або Neisseria meningitidis, оскільки ці бактерії інгібуються у присутності високих концентрацій поліанетосульфонату натрію (SPS).

Ось чому ця сполука не повинна перевищувати 0,025% у пляшках з культурою крові.

З іншого боку, якщо вперше відбирають зразок культури крові в пробірках для пилососа, ці пробірки мають концентрацію SPS, токсичну для менінгококів та гонококів, тому кров повинна бути передана протягом 1 години в систему відварної культури.

Як дізнатися, чи є позитивна культура крові чи зараження

Культура крові вважається зараженою, коли спостерігається зростання лише одного флакона з культурою крові від загальної кількості взятих. І підозра на забруднення зростає, якщо ізольований мікроорганізм є звичною мікробіотою шкіри: приклад: коагулаза Staphylococcus coagulase негативна, Propionibacterium spp, серед інших.

Однак у хворих з імунокомпрометацією жодним мікроорганізмом не слід нехтувати, але в цьому випадку мікроорганізм повинен з’явитися в декількох зразках.

З іншого боку, якщо чутливість до антибіотиків одного мікроорганізму, виділених у двох різних зразках, однакова, зараження реальна.

Ще однією характеристикою є бактеріальне навантаження, оскільки заражені культури крові виростають пізно, тоді як реальні інфекції у нелікованих пацієнтів, як правило, позитивні через 14 годин інкубації, коли мікроорганізм не турбує.

З іншого боку, у пацієнтів, які отримують антимікробні засоби, мікроорганізму, який займається, може знадобитися час для зростання, оскільки навантаження дуже низька.

Поява більше одного мікроорганізму може припускати зараження, але якщо один і той же результат повторюється в декількох знімках з різних ділянок, то це реально.

Список літератури

1. "Культура крові". Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 3 липня 2019, 17:28 UTC. 14 липня 2019, 19:05 en.wikipedia.org
2. Ерве Б. Нові технології в мікробіологічній діагностиці: автоматизація та деякі застосування в ідентифікації мікроб та дослідження чутливості. Преподобна медична клініка. Підраховує. 2015 рік; 26 (6) 753-763. Доступний за адресою: reader.elsevier.com
3. Вільярроел П. Глава 20: Сепсис та ризик серцево-судинних захворювань. Серцево-судинне здоров'я. С. 187-194. Доступно за адресою: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM. Кров'яні культури: Що вони вам сказали і що ви робите? Хворий глобус. 2012 рік; 11 (26): 146-163. Доступно за адресою: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Вірогідність успіху в отриманні позитивної культури крові. Мед. 2017 рік; 33 (1): 28-40. Доступно за адресою: scielo.org