ПЕРЕХРЕСНІ ТЕСТИ: ДЛЯ ЧОГО ВОНИ, ТЕХНІКА, ОБГРУНТУВАННЯ, ЕТАПИ - ЛІКИ - 2025

Crossmatch ряд лабораторних досліджень проводиться з метою визначити , чи сумісні з кров'ю реципієнта продуктів крові від донора ( в основному цільної крові і упаковують кулястої).

Це додатковий додатковий тест на сумісність АВО та резус-коефіцієнт. Причина схрещування полягає в тому, що іноді дві особи (донор-реципієнт) можуть мати одну і ту ж групу АВО та резус, але їх кров все ще несумісна.

Джерело: unsplash.com

Така несумісність пояснюється наявністю антитіл проти ряду білків еритроцитів, відомих як незначні антигени. Ці антигени не перевіряються регулярно, оскільки вони відносяться до групи крові (АВО) та резус-фактора.

Це пояснюється тим, що мінорні антигени набагато рідше і мають змінну експресію у кожної людини, тому згрупувати їх у категорії практично неможливо, як це робиться з груповим та резус-фактором.

Натомість донорські еритроцити змішують із сироваткою пацієнта (тест на велику відповідність) та еритроцитами пацієнта із сироваткою донора (тест на незначну відповідність) для виявлення наявності реакцій антиген-антитіло.

Якщо в сироватці пацієнта чи донора є антитіла до мінорних антигенів, тест вважається позитивним, тому в більшості випадків цю певну одиницю крові не можна переливати.

ABO Group

Щоб повністю зрозуміти, що стосується перехресних реакцій, спершу потрібно знати основи груп крові.

У цьому сенсі найголовніше - знати, що кров можна класифікувати на чотири групи: A, B, AB та O.

Кожна з цих груп виражає на поверхні еритроцитів певний білок (антиген), який ідентифікується як чужорідний елемент антитілами потенційного рецептора іншої групи.

Найбільш яскраво, що стосується реакцій антиген-антитіло при зіставленні крові - це те, що для існування антитіл не потрібно попереднього впливу антигену. Це відомо як природні антитіла.

Природні антитіла

Як правило, щоб антитіла існували в організмі індивіда, необхідно, щоб білі кров'яні клітини людини були раніше піддані впливу антигену.

Це означає, що при першому контакті чужорідного антигену з організмом немає антитіл, оскільки вони утворюються пізніше, після початкового контакту. Тому в імунній системі неможливо мати антитіла, наприклад, до певного вірусу, якщо він раніше не був йому підданий.

Єдиним винятком із вищезазначеного є антигени проти АВ. У цих випадках у людини є антитіла проти антигену, яких не мають їх еритроцити, хоча вони ніколи не контактували з еритроцитами іншої людини. Це відомо як природні антитіла.

Антигени та антитіла, що відносяться до групи крові

Групи крові визначаються у випадку системи АВО за наявністю специфічних антигенів (А або В) на мембрані еритроцитів і, навпаки, антитіл проти відсутнього антигену на мембрані еритроцитів.

Таким чином, людина з групою крові А експресує антиген А на поверхні своїх еритроцитів, тоді як в сироватці крові є анти-В антитіла.

Навпаки, у пацієнтів групи В антиген В виявляється, тоді як антитіла є анти-А.

Тепер у пацієнтів з АБ крові є антигени А і В. Тому, антитіл немає, оскільки це може знищити еритроцити цієї людини.

Зовсім навпаки відбувається в групі О, де в мембрані еритроцитів немає жодного з двох антигенів (ні А, ні В), тоді як у сироватці крові є анти-А та анти-В антитіла.

Несумісність групи АВО

З вищесказаного легко можна зрозуміти сумісність груп крові АВО, оскільки знаючи антиген мембрани еритроцитів, автоматично знають антитіла в сироватці крові. Так що:

- Кров А сумісна з групою А та групою О.

- Група крові B сумісна з кров’ю B і O.

- Люди з групою O можуть отримувати тільки O кров (оскільки вони мають анти-А та анти-В антитіла), хоча їх кров без проблем приймають усі інші групи, оскільки їй не вистачає антигенів.

- Нарешті. ті, хто має групу крові AB, можуть отримувати кров з усіх інших груп (A, B, O і, звичайно, AB), оскільки вони не мають антитіл проти жодного з антигенів. Однак тільки люди групи АВ можуть отримувати кров АБ, оскільки всі інші групи мають антитіла, які руйнували б ці еритроцити.

Незначні антигени

Як і у групах АВО, на поверхні еритроцитів може знаходитись ряд білків, які функціонують як антигени так само, як антигени групи АВО.

Однак ці антигени є не у всіх людей. Їх поєднання неоднорідне, а пенетрантність (рівень експресії білка) мінлива, тому класифікація на такі групи, як та, що існує для АВО та Rh, неможлива. Саме тут він і походить від «незначних антигенів», також відомих як «антигени низької частоти».

Хоча вони і не часті, можуть існувати природні антитіла проти незначних антигенів. Серед них найпоширенішими є Льюїс, МНС, анти N, Келл, Даффі, анти Фіб та Кідд. Усі вони відповідальні за дуже серйозні гемолітичні та посттрансфузійні реакції.

Крім того, може бути випадок сенсибілізації проти незначних антигенів за попереднього контакту, або із зазначеними антигенними білками через попередні переливання, або через перехресний імунітет.

Перехресний імунітет

Кажуть, що існує перехресний імунітет, коли два антигени з двох різних джерел (наприклад, еритроцита та бактерії) дуже схожі, до того часу, що антитіла проти одного з цих антигенних білків також реагують з іншим, оскільки вони майже однакові .

Щоб зрозуміти це краще, візьміть попередній гіпотетичний приклад (антигени еритроцитів та бактерій). У жодному випадку природних антитіл немає, але якщо людина потрапляє на бактерії, вони вироблять антитіла проти нього.

Такі антитіла згодом реагуватимуть на еритроцити, якщо його антигени будуть дуже схожі на антибактерії, які викликали утворення антитіл.

Якщо це станеться, еритроцити з цим антигенним протеїном не можна давати людині, яка має антитіла, оскільки це може бути відторгненням. У цьому полягає важливість перехресних реакцій.

Для чого таке схрещування?

Оскільки неможливо групувати кров різних індивідів на основі мінорних антигенів, єдиний спосіб дізнатися, чи є антитіла проти мінорних антигенів еритроцитів іншої людини в крові однієї людини - через схрещування. .

У тих випадках, коли є антитіла, викликається реакція гемолізу або аглютинації, через що робиться висновок, що реакція була позитивною; тобто є антитіла проти незначних антигенів (хоча точно невідомо, який саме). Інакше тест негативний.

Основа

Перехресні поєднання засновані на реакції антиген-антитіло. Тому за допомогою них можна виявити, чи є в сироватці крові реципієнта антитіла проти антигенів еритроцитів донора (або навпаки), що викликає реакцію антиген-антитіло.

Якщо антитіл немає, реакція не виникає, і тест повідомляється про негативний. Навпаки, якщо реакція позитивна (під час тесту є гемоліз або аглютинація), можна зробити висновок про наявність антитіл.

У зв'язку з цим важливо відзначити, що можуть бути антитіла проти еритроцитів як у донорській, так і в реципієнтній сироватці. Ось чому існує два типи перехресних реакцій.

Види перехресних реакцій

Антитіла проти донорських еритроцитів можуть існувати в сироватці пацієнта; але може статися і навпаки, тобто антитіла в сироватці донора проти еритроцитів пацієнта.

Ось чому існує два типи кросматжу:

- Основний кросматч.

- Незначний перехрестя.

Обидва типи проводяться регулярно в банку крові перед переливанням препаратів крові, оскільки якщо будь-який з аналізів є позитивним, існує високий ризик переливання реакцій, які можуть загрожувати життю пацієнта.

Основний кросматч

Цей тест оцінює, чи містить сироватка реципієнтів антитіла до еритроцитів донора.

Якщо це станеться, препарати крові не можна вводити, оскільки велика кількість антитіл, присутніх у плазмі пацієнта, дуже швидко знищить еритроцити донора, породжуючи катастрофічні реакції в організмі реципієнта. Ці реакції настільки сильні, що можуть бути небезпечними для життя.

Незначний перехрестя

У цьому випадку визначається, чи є антитіла проти еритроцитів реципієнта в сироватці донора.

Якщо так, антитіла почнуть руйнувати еритроцити реципієнта. Однак, враховуючи, що кількість антитіл обмежене, реакція є менш інтенсивною; хоча це все ще небезпечно.

Фази

І головний, і малий кросматч поділяються на три фази:

- фізіологічний розчин.

- Теплова або інкубаційна.

- Кумбс.

На першій фазі еритроцити і сироватка змішуються в сольовому розчині. Згодом додають альбумін, і зразок інкубують при 37 ° С протягом 30 хвилин, щоб остаточно перейти до фази кумб.

Техніка

Методика схрещування є досить простою, оскільки передбачає додавання донорських еритроцитів до сироватки пацієнта (основний кросматч), а також еритроцитів реципієнта до сироватки донора (незначне схрещування).

Для того, щоб викликати реакцію антиген-антитіло протягом відносно короткого часу, необхідно виконати ряд стандартизованих етапів. Ці кроки підсумовані спрощеним чином нижче.

Важливо зазначити, що наступний розділ описує основний тест на сумісність, хоча кроки є однаковими для тесту на незначну сумісність, але обмінюють походження еритроцитів та сироватки крові.

Сольова фаза

- Додайте в пробірку 2 краплі сироватки від реципієнта (від донора, якщо це другорядне схрещування).

- Взяти зразок еритроцитів у донора (у реципієнта, якщо це незначний перехресний збіг).

- Промийте і центрифугуйте еритроцити.

- Повторне використання розчину від 3% до 5%.

- Помістіть краплю цього розчину в пробірку, що містить сироватку реципієнта.

- Акуратно перемішайте.

- Центрифуга.

- Прочитайте результат на дисплеї.

Теплова фаза

- Додайте 2 краплі 22% альбуміну в пробірку, де закінчували фізіологічну фазу.

- Інкубуйте при 37 ° С протягом 30 хвилин.

- Відцентруйте протягом 15 секунд.

- Прочитайте результат на дисплеї.

Фаза Кумбса

- Візьміть клітини з пробірки і промийте їх сольовим розчином.

- Усуньте супернатант.

- Додайте дві краплі реактиву Кумбса.

- Акуратно перемішайте.

- Центрифуга від 15 до 30 секунд.

- ресуспендують клітини та оцінюють у оглядовій лампі на наявність аглютинації чи гемолізу.

Якщо в будь-якій з фаз відбувається аглютинація або гемоліз, результат вважається позитивним.

Список літератури

1. Hall, TC, Pattenden, C., Hollobone, C., Pollard, C., & Dennison, AR (2013). Політика переливання крові в елективній загальній хірургії: як оптимізувати співвідношення перехресного матчу та переливання крові. Трансфузійна медицина та гемотерапія, 40 (1), 27-31.
2. Silvergleid, AJ, Wells, RF, Hafleigh, EB, Korn, G., Kellner, JJ, & Grumet, FC (1978). Тест на сумісність із застосуванням еритроцитів, мічених 51 хромом, у пацієнтів з позитивним схрещуванням. Переливання, 18 (1), 8-14.
3. Kulkarni, N., Ali, M., Haray, PN, Joseph, A., & Masoud, A. (2006). Електронна система перехресного узгодження. Чи потрібні звичайні передопераційні перехресні збіги крові для колоректальних резекцій ?. Ендоскопія, 38 (11), Плакат_50.
4. Heal, JM, Blumberg, N., & Masel, D. (1987). Оцінка схрещування, співвідношення HLA та АВО для переливання тромбоцитів тромбоцитарним пацієнтам. Кров, 70 (1), 23-30.
5. Арслан, Ö. (2006). Електронний кросмат. Огляди трансфузійної медицини, 20 (1), 75-79.
6. Ву, К.К., Гук, Ж.К., Коепке, Дж. А., і Томпсон, Дж. С. (1977). Вибір сумісних донорів тромбоцитів: перспективна оцінка трьох методів перехресного узгодження. Переливання, 17 (6), 638-643.
7. Schonewille, H., Zijl, AMV, & Wijermans, PW (2003). Важливість антитіл проти антигенів РБК низької частоти в повному та скороченому перехресному співставленні. Переливання, 43 (7), 939-944.