БАКТЕРІОЛОГІЧНА ПЕТЛЯ: ХАРАКТЕРИСТИКИ, ВИДИ, ВИКОРИСТАННЯ - БІОЛОГІЯ - 2025

Бактеріологічні петлі є робочим інструментом , використовуваним мікробіологи для посіву культур мікроорганізмів (бактерій або грибів). Це, мабуть, інструмент, який найбільше використовують ці професіонали.

Її використання здається простим, але насправді вимагає багато тренувань. Перед початком посіву петлю необхідно простерилізувати в конфорці Бунзена, потім взяті мікробний прищеп, який може вийти з рідкої культури або твердої культури.

Види бактеріологічних петель. Джерело: Не надано машиночитаного автора. お や お припущений (на основі претензій щодо авторських прав).

Після взяття прищепи його можна осадити у рідкому середовищі або висіяти у твердому середовищі. Після кожної процедури петлю стерилізують знову. Ручка також підходить для нанесення мікробних мазків на предметне скло.

Бактеріологічна петля має багато назв, включаючи: платинову петлю або петлю, петлю прищеплення або насіннєву петлю, однак справжня її назва - петля Коле.

Матеріал, з якого виготовлена ​​ручка, як правило, є нікель-хромовим (ніхромним) сплавом або платиною. Ще один різновид, доступний на ринку, - це пластикові одноразові бактеріологічні петлі.

З іншого боку, існує кілька типів бактеріологічних петель, кожна з яких виконує функцію в межах завдань, що виконуються мікробіологом. Вибір ручки буде залежати від того, що потрібно зробити.

Наприклад, для здійснення стриатуму виснаженням для виділення мікроорганізму використовується платинова петля, яка закінчується замкнутим кільцем, незалежно від того, відкалібрована вона чи ні.

Оскільки, якщо потрібно посіяти зразок сечі, то, коли важливо кількісно оцінити ОМС, необхідно використовувати калібровану петлю. Так само для щеплення біохімічних тестів, які потребують посіву пункцією, необхідна петля голки. Важливо, щоб з ручкою працював навчений персонал.

характеристики

Бактеріологічні петлі складаються з двох крайнощів. Один кінець відповідає рукоятці або підставі, а інший - самій ручці.

Ручка основи або ручки

Основа служить для стискання ручки під час поводження. Зазвичай він металевий, але має теплоізолятор, щоб запобігти опіку оператора, коли наконечник ручки стерилізується на запальничці. Він вимірює приблизно 20 см, хоча може бути і довше. У ньому є нитка для регулювання ручки.

Ручка

Це функціональний кінець, тобто це частина, яка контактує з мікроорганізмами та з культуральним середовищем. Він складається з тонкого дроту, який вставляється в основу.

Ручка може бути виготовлена ​​з ніхрому або платини, саме тому її іноді називають платиновою ручкою. Вона завдовжки приблизно 6,5 см і має калібру приблизно 0,20 мм. Ручка з ручкою може вимірювати 26,5 див. Вимірювання можуть відрізнятися від виробника до виробника.

Типи

Існує кілька типів бактеріологічних петель і кожна з них має специфічне використання. Типи ручок такі: калібрована кільцеподібна ручка, калібрована кільцева ручка, пряма або голка ручка, рукоятка шпателя, ручка у формі "L" та ручка з гострим наконечником.

З іншого боку, ручки можуть бути постійними або одноразовими. Ті, що призначені для постійного використання, стерилізуються в запальничці, є багаторазовими і дуже міцними. Хоча одноразові товари стерильні на заводі, вони використовуються лише один раз і відкидаються.

Програми

Кільцева ручка, не калібрована

Це найбільш використовувана ручка в лабораторії мікробіології. Він використовується для взяття інокуляту з мікробної суспензії (рідка середовище) або частини колонії (тверда середовище) для висіву в інше культуральне середовище, або біохімічного тесту, або більш збагаченого або селективного середовища, залежно від випадку. Він також корисний для нанесення мікробних мазків на предметне скло.

За допомогою цього типу петлі початковий прищеп можна прокреслити. Він також сконструйований так, щоб він плавно ковзав по агару, не пошкоджуючи його. Звичайно, для цього потрібен навчений персонал, який поводиться з технікою висіву, застосовуючи правильну силу та рухи, щоб зробити гарну смужку.

За допомогою цієї ручки можна виконати різні методи посіву. Наприклад, тверді середовища в чашках Петрі зазвичай висіваються виснаженням (існує кілька методик, див. Відео 1).

Ця методика призначена для отримання ізольованих колоній з метою вивчення та ідентифікації їх, особливо коли проба є полімікробною, тобто культура не є чистою (вона містить більше одного типу мікроорганізмів).

Натомість клини висаджують у простий зигзаг для отримання бактеріальної маси, не потребуючи в цьому випадку для виділення колоній.

Іноді їх також використовують для взяття певних зразків. Наприклад, Rojas et al. Використовували бактеріологічну петлю для збору прорізаних зразків вагінальної тканини у щурів.

Бактеріологічна петля з кільцевим кінцем, не калібрована. Джерело: Pixinio.com

Кільцеподібна ручка, калібрована

Ця ручка, як випливає з назви, відкалібрована для отримання певної кількості мікробної суспензії. Він застосовується, коли прищеплювач повинен відповідати тому, що стандартизовано в даній області техніки.

Наприклад, це дуже часто для посадки культур сечі. У цьому випадку можна використовувати калібровану петлю 0,01 мл і 0,001 мл.

Слід зазначити, що калібровані ручки мають похибку, яка змінюється залежно від кута, з якого береться проба та розміру гирла контейнера.

Якщо петлю 0,001 мл вставити вертикально в ємність з невеликим гирлом (≤ 7 мм), то взята кількість буде на 50% меншою від бажаної.

Це відбувається тому, що чим менший діаметр гирла ємності, тим вище поверхневий натяг і, отже, сили адгезії між (скло - рідина) збільшуються. Це призводить до того, що рідкий заряд, взятий ручкою, буде меншим.

Оскільки, якщо взяти його під кутом 45 ° у ємності з широким гирлом (≥ 22 мм), може бути зібрано на 150% більше необхідної кількості. У цьому випадку поверхневий натяг нижчий, а сили злиття скла / пластику зменшуються, в той час як сила зчеплення рідко-рідина збільшується.

Через вищезазначене іншим способом кількісного визначення колонієутворюючих одиниць іноді є переважні для культур сечі.

Пряма або голкова ручка

Його ще називають ручкою з нитками. Він використовується для щеплення певних біохімічних тестів, особливо тих, які потребують посіву за допомогою методу проколу. Наприклад, напівтверді носії, які готуються у вигляді блоку, такі як: SIM, MIO та O / F носій.

Крім того, у випадку MIO та SIM, які оцінюють рухливість, важливо, щоб прокол проводився голковою петлею, оскільки інтерпретація позитивної моторики відбувається тоді, коли бактерії виростають у бік початкового посіву.

Тест, прищеплений петельним циклом, може підробити результати (хибнопозитивний). З цієї причини при такому висіванні насіння слід подбати про те, щоб прокол був унікальним, і щоби його видалити, він вийде в тому ж напрямку, в який увійшов.

Ще одне випробування, яке повинно бути засіяне голкою, навіть якщо воно готується у формі клина, - це Kligler. У цьому випробуванні кисень не рекомендується проникати вглиб агару, оскільки необхідне кисневе середовище для виникнення певних хімічних реакцій. Ця ручка також використовується для дотику до певної колонії з метою субкультури.

Ручка шпателя

Більшість мікроорганізмів дають м’які колонії, що легко піддаються проливанню. Однак є деякі мікробні агенти, колонії яких тверді і сухі, наприклад мікобактерії взагалі та деякі гриби. У цих випадках корисно використовувати рукоятку шпателя.

Ручка у формі "L"

Найчастіше його використовують для перезволоження грибкових культур, особливо цвілі.

Гостра ручка наконечника

Це корисно для прийому дуже малих колоній, присутніх у полімікробних культурах, щоб мати можливість субкультурити їх.

Техніка посіву

Відео 1

Стерилізація ручки з платини

Ручка повинна бути стерилізована до та після використання. Щоб стерилізувати бактеріологічну петлю в запальничці, поступіть так: ручку слід помістити у верхню частину полум'я, прийнявши максимально вертикальне положення таким чином, щоб стерилізувати від кінчика вгору.

Коли дрібна нитка стає яскраво-червоною, можна сказати, що вона стерильна. Для його використання охолоджують і відбирають обраний зразок. (Дивіться відео 2).

Стерилізація бактеріологічної петлі

Відео 2

Список літератури

1. "Бактеріологічна петля" Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 23 липня 2019, 13:31 UTC. 18 серпня 2019, 22:45. Вікіпедія.
2. Herrera D, Lopez P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Калібровані металеві ручки для мікробіологів: альтернатива національного виробництва. Соц. Мікробіол. 2010 р .; 30 (1): 37-42. Доступно за адресою: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Мікробіологічна діагностика Бейлі та Скотта. 12 ред. Редакція Panamericana SA Аргентина.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Мікробіологічна діагностика. 5-е видання. Редакція Panamericana SA Аргентина.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F та ін. Визначення знеболюючого ефекту гексанового екстракту з квіток Eupatorium arsenei у моделі гострого болю у щурів. мекс. наука. господарство. 2015 рік; 46 (1): 64–69. Доступно за адресою: scielo.org