КОНГО ЧЕРВОНИЙ: ХАРАКТЕРИСТИКИ, ПІДГОТОВКА ТА ЗАСТОСУВАННЯ - БІОЛОГІЯ - 2025

Конго червоний є азо фарбник для білків , утворених шляхом поєднання солі діазонію і активний ароматичне кільце. Ця речовина здатна поглинати електромагнітне випромінювання у видимому спектрі, саме тому має інтенсивне забарвлення.

Він заряджений негативно. Тому він має спорідненість до позитивно заряджених клітинних компонентів, таких як певні білкові речовини. Її колір змінюється залежно від рН. У цьому сенсі, якщо середовище кисле (<ніж pH3), колір інтенсивно-синій. Між pH3 - pH 5,2 - це фуксія (зона повороту), а при> pH 5,2 колір - глибоко червоний.

Збезводнений колоїдний розчин Конго Червоний та Конго Червоний. Джерело: Pixinio.com та Wikipedia.com

Це дуже універсальна речовина, оскільки має багаторазове використання. Його використовували як барвник в текстильній промисловості, а також для клітин і тканин.

Також зробити культурні середовища, які вимірюють ферментативну дію, як показник рН, як контрольну речовину при оцінці правильного функціонування спектрофотометрів, у дослідженні утворення біоплівки або діагностиці амілоїдів.

Так само це дозволило розрізнити бактеріальні та грибкові серотипи шляхом виявлення конкретних структур у їх стінці (ліпополісахариди).

Характеристика Конго червоного кольору

Цю речовину було відкрито Беттігером у 1884 р. Це похідне діазонію, утворене біс-діазойною кислотою бензидину з нафтіоновою кислотою. Червона молекула Конго вимірює 21 Армстронга, а молекулярна маса - приблизно 8000 г / моль.

Конго-червоний характеризується розчинністю у воді, а тим більше в органічних розчинниках, таких як етанол, утворюючи колоїдний розчин.

Він має спорідненість до целюлози, до амілоїдної тканини та до позитивно заряджених клітинних компонентів.

Підготовка

Конго-червоний готується в різних концентраціях залежно від методики, яка буде використовуватися. Більшість використовують Конго червоний на рівні 1%, 2%, 0,1%, серед інших.

Наприклад, для приготування 2% червоного конго, 2 г зневодненого харчового барвника слід зважити і додати 100 мл дистильованої води. Потім його зберігають у бурштиновій пляшці.

Програми

Як барвник в текстильній промисловості

Деякий час він широко використовувався в текстильній промисловості завдяки закріпленню на бавовні, але в даний час він утилізується через те, що він є канцерогенним, а також тому, що колір не стійкий, знебарвлюючись тертям.

Визначення здатності до утворення біоплівки

Показано, що біофільмотворча здатність мікроорганізмів є фактором вірулентності.

У цьому сенсі червоний барвник Конго використовується як метод визначення утворення біоплівки. Конго червоний зв’язується з екзополісахаридами, присутніми в біоплівці. Однак порівняно з іншими методами він є найменш рекомендованим через високі помилкові негативи.

У способі використовується червоний агар Конго, він складається з агару крові як основи, глюкози (10 г / л) та червоного барвника Конго (0,4 г / л). Штам, що підлягає оцінці, висівають у середовище та інкубують протягом 24 годин при 37 ° С, а потім інкубують протягом 48 годин при кімнатній температурі.

Позитивний тест засвідчується, якщо спостерігаються кристалічні колонії чорного кольору та сухого вигляду.

Контроль якості спектрофотометрів

Щоб оцінити, чи відповідає обладнання для вимірювання абсорбції або транзакцій фотометричним параметрам, встановленим міжнародними регламентами, можна встановити просту техніку, щоб встановити, чи обладнання видає результати в межах допустимості.

Однією з методик оцінювання є використання конго червоного кольору на основі ізобестичної точки.

Ізобезстична точка - це довжина хвилі, при якій червоне Конго випромінює ту саму поглинання незалежно від рН, концентрації та температури. Значення поглинання є фіксованим і може бути використане як еталонне.

Теоретична ізобестична точка червоного Конго, як відомо, становить 541 нм. Якщо отримане значення різне, відомо, що обладнання має проблеми з дрейфом довжини хвилі, і це потрібно перевірити спеціалізованим фахівцем.

Підготовка засобів масової інформації

Ortiz et al. Охарактеризуйте культуральне середовище, приготоване з червоним барвником Конго та карбоксиметилцелюлозою, що називається агар CMC, з метою виявлення мікробних штамів целюліту; тобто целюлозні продуценти (ендоглюконези, екзоглюканази та β-глюкозидази).

Цей засіб має інтенсивне забарвлення. Колір буде розсіюватися під дією ферменту ендоглюканази, який порушує структуру карбоксиметилцелюлози. Це говорить про позитивну реакцію.

Зниження в'язкості та абсорбції дозволяє кількісно визначити активність ферментів. Наприклад, у штамів Streptomyces sp.

Ідентифікація мікроорганізмів

Конго червоний має спорідненість до полісахаридних структур певних штамів, що забезпечує ідентифікацію цих мікроорганізмів. Серед них кишкова паличка та шигелла флекснери.

Конго-червоні агарові пластини також використовуються для отримання характерних колоній, як це стосується Azospirillum sp, який дає серед інших червоно-червоні колонії.

Клітинна і тканинна пляма

Одне з найпоширеніших застосувань Конго червоного - його корисність у діагностиці амілоїдозу. Це дивне захворювання складається з позаклітинного скупчення аномального білка в різних органах. Цей аномальний білок виробляється в кістковому мозку і називається амілоїдом.

Конго червоний має високу спорідненість до цієї речовини. Ця властивість була використана для виявлення його присутності в гістологічних зрізах тканин. Конго червоний використовується разом з гематоксиліном / еозином для цієї мети.

Об’єднання амілоїдної тканини та конго-червоного відбувається через неполярні водневі зв’язки, між карбоксильними групами та аміногрупою. Амілоїдний білок забезпечує карбоксильні групи (СООН), а Конго - аміногрупу.

Амілоїдна тканина забарвлюється в різні відтінки, починаючи від рожевого до глибокого червоного, коли їх бачите під світловим мікроскопом. У мікроскопах з подвійно поляризованим світлом ці препарати спостерігаються з патогномонічним яблучно-зеленим відблиском.

Тобто вони представляють дихроїзм, оскільки амілоїдні волокна є анізотропними. Це спостереження підтверджує діагноз.

Фарбування тканин Конго червоним є сумісним з іншими методами діагностики, такими як імуноцитохімічні методи, і навіть може бути повторно забарвлене.

Як показник рН

Властивість перетворюватися на зміну pH використовується методом хромоендоскопії.

У цій техніці використовуються барвники та показники рН, які дозволяють виявити певні патології. Серед них - використання конго червоного кольору, що дозволяє виявити ранні вогнища раку на слизовій оболонці шлунка, використовуючи його як маркер кислотності.

Метод заснований на тому, що Конго червоний при кислотному рН - чорний. Тому після нанесення розчину Конго червоного на слизову шлунка будуть обрані ділянки, де є блідість, для взяття проби для біопсії, тобто там, де немає вироблення кислоти. Це говорить про наявність ракового вогнища або втрату тім'яних клітин.

Список літератури

1. "Конго червоний". Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 8 травня 2019, 12:13 UTC. 16 травня 2019, 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Новий метод кількісної оцінки активності ендоглюканази на основі целюлозно-конго-червоного комплексу. Орінокіа. 2011 червень; 15 (1): 7-15. Доступно з: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Виробництво біоплівки в генотипах золотистого стафілокока, виділеного від маститу великої рогатої худоби на Кубі. Преподобний Салюд Anim. . 2013 грудень; 35 (3): 189-196. Доступно за адресою: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G та ін. Шкірні прояви системного амілоїдозу як діагностичний ключ: Клінічний випадок. Преподобний медик. Чилі. 2012 Квітень; 140 (4): 499-502. Доступно на: scielo.
5. Дуймович C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Спектрофотометри та фотоколориметри Практичний посібник з оновлення. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (вересень-грудень): Доступно за адресою: redalyc.org
6. Marín J, Díaz J та Solís J. Chromoendoscopy при інфекції Helicobacter pylori: чи час реакції? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Органічна хімія. Редакційна реверте. Барселона, Іспанія. Доступно за адресою: books.google.co.ve
8. Мурілло М. Технології гістологічного фарбування тканин. Університет Гвадалахари, Мексика. Доступно за адресою: academia.edu
9. Paillié M. Визначення целюлолітичної, лігнінолітичної та амілолітичної активності актинобактерій, виділених з ризосферного ґрунту конюшини білої (Trifolium repens). 2012. Pontificia Universidad Javeriana Факультет промислових мікробіологій Богота DC доступний за адресою: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Виділення та ідентифікація Azospirillum sp. на гвінейській траві (максимум Panicum Jacq.) з долини Сезар. Пасовища та корми, 2010; 33 (3): 1-8 Доступно у: науло.