МАЗОК КРОВІ: ХАРАКТЕРИСТИКИ, ВИДИ, МЕТОДИ ТА ГІСТОЛОГІЯ - БІОЛОГІЯ - 2025

Мазок крові є периферичним мазок крові , який використовується для аналізу компонентів , присутні в кровотоці. Спостереження мазка крові дає гематологічні дані, які дуже корисні для діагностики та подальшого спостереження за багатьма патологіями.

Мазок крові дозволяє кількісно оцінити кількість різних типів лейкоцитів (формула лейкоцитів), а також дозволяє провести аналіз морфології та форми еритроцитів, лейкоцитів та тромбоцитів.

Приготування мазка крові. Джерело: Кров у лабораторному склянці. Public DomainPictures.net

У ньому можна виявити порушення в кількості клітин, такі як: лейкоцитоз або лейкопенія, лімфоцитоз або лімфопенія, нейтрофілія або нейтропенія, тромбоцитоз або тромбоцитопенії та еозинофілія. Також можуть спостерігатись відхилення розмірів та форми клітин.

Крім того, можна виявити різні види анемій, лейкемії та бактеріальні або паразитарні інфекції крові.

Для цього існують різні види мазків, які виконуються залежно від мети дослідження. Є тонкі мазки і густі мазки. Ці мазки відрізняються технікою виконання та метою дослідження.

Ті, хто має тонкі краплі, використовуються як доповнення для повного гематології. Це дає дані про лейкоцитарну формулу, на додаток до аналізу форми та морфології трьох клітинних рядів, що складають кров: червоного ряду, білого ряду та тромбоцитів. Хоча вони також слугують доповненням до вивчення густої плівки крові.

Товста плівка використовується для діагностики захворювань, викликаних гемопаразитами, таких як малярія або малярія, токсоплазмоз, лейшманіоз, хвороба Шагаса, бабезіоз та мікрофіляріоз.

Характеристика мазка крові

Хороший мазок крові повинен відповідати певним характеристикам. Серед них можна відзначити:

-Зразок повинен відповідати мінімальним вимогам якості, щоб бути репрезентативним.

-Відбір проб повинен бути добре виконаний.

-Своєчасне виконання мазка.

-Якщо це робиться з венозною кров’ю, перед тим як зробити мазок, використовуйте антикоагулянт, який не деформує клітини, і перемішуйте пробірку.

-Якщо це робиться з капілярною кров’ю, відкиньте першу краплю.

-Розклад повинен бути однорідним. Це забезпечує рівномірний розподіл клітин і можливість аналізу крові на кількість та кількість клітин.

-Борти мазка повинні бути гладкими від початку до кінця.

-Мазок повинен відповідати запасам від 1 до 2 мм до сторін слайда.

-Шар мазка повинен поступово зменшуватися в товщину від початку до кінця (мазати тонкою краплею методом ковзання).

-Ви повинні бути належним чином марковані, щоб уникнути плутанини зразків.

-Виправити плями належним чином для чіткого спостереження за елементами крові.

-Дайте мазку дуже добре висохнути перед тим, як монтувати препарат під мікроскоп. Якщо нанести масло занурення на вологий мазок, це призведе до утворення міцел, які перешкоджають побаченню клітин.

Види мазка крові

Мазки периферичної крові можна класифікувати на тонкі мазки та густі мазки. Ті, хто має тонкий шар, використовуються для дослідження лейкоцитарної формули та морфологічного спостереження за клітинами крові. Також можна побачити позаклітинні бактерії, такі як борелія та внутрішньоклітинні гемопаразити, такі як плазмодій.

У тонкої плівки можна виділити види паразита, отже, це більш специфічна техніка, ніж густа крапля, але густа крапка більш чутлива, оскільки це методика концентрації, що використовується для вичерпного пошуку позаклітинних гемопаразитів.

Існує два види мазків з тонкою краплею: ​​ті, які виконуються на слайдах, і такі, які виконуються на покривах. Густі мазки виконуються на слайдах.

Методи взяття зразків крові

Мазки крові можуть бути зроблені з пункції капіляра або з венозного зразка, взятого з антикоагулянтом. Якщо його проводять з крові з антикоагулянтом, мазок можна готувати до 2 годин після взяття проби.

З обережністю слід застосовувати антикоагулянти, які не деформують клітини крові. Найкращий варіант - EDTA. Навпаки, слід уникати використання антикоагулянтів, таких як тринатрієвий цитрат.

Якщо проба взята капілярною пункцією, мазок слід продовжити негайно, перш ніж утвориться кров.

Першу краплю слід відкинути, що дозволяє наступній краплі спонтанно вийти, щоб уникнути розведення зразка тканинною рідиною. Це найбільш рекомендована методика спостереження за клітинною морфологією, оскільки в крові немає ніяких добавок.

Для спостереження за гемопаразитами Соларі та ін. Зробили висновок у своїх дослідницьких роботах, що обидві методи (венепункція та капіляр) однаково ефективні.

Види забору крові: А. Капілярна пункція. В. Пункція вен. Джерело: A. Flickr.com B. Pxhere.com

Методика приготування мазка крові

Мазок крові можна виконати вручну на слайдах мікроскопа або на кришці або слайді. Це також можливо за допомогою автоматизованого обладнання.

-Замазує мазки

Це техніка, яку віддають перевагу більшість лабораторій завдяки простому поводженню.

За допомогою піпетки Пастера покладіть не дуже густу або дуже дрібну краплю крові в центр одного кінця чистого слайда.

Мазок робиться за допомогою ще однієї гірки із заземленим кінцем. Шліфувальний предметне скло розміщується перпендикулярно протилежного кінця, де знаходиться крапля.

Він нахиляється до кута між 30 - 45 ° і ковзає в напрямку падіння; При дотику вона лінійно розширюється через край земної гірки і постійним і визначеним рухом лист повертається; до досягнення кінця слайд піднімають.

Таким чином гомогенний шар розподіляється по поверхні приймаючої гірки.

Мазку дають висохнути. Потім він фіксується і фарбується кращим плямою. Перед переглядом під мікроскопом дайте добре висохнути. На обличчя наносять краплю олії, що показує мазок, і спостерігають під світловим мікроскопом.

Мазок крові на слайді. Зображення вгорі: нерозкритий мазок. Нижнє зображення: зафарбований мазок. Джерело: Coinmac

Частини мазка, зроблені на слайдах

У цьому типі мазка можна виділити три визначені зони: голова, тіло та хвіст. Голова відповідає тій ділянці, з якої починається мазок, це найгустіша область, і це не добре спостерігати.

Тіло є центральною або проміжною частиною мазка, найкраще спостерігати під мікроскопом, оскільки там клітини рівномірно розподілені і їх морфологія зберігається.

Хвіст відповідає заключній частині мазка; тут розподіл вже не рівномірний, і морфологія еритроцитів має тенденцію до втрати.

Контроль якості в техніці слайдів

У цій техніці вона відіграє фундаментальну роль:

-Очищення та знежирення слайда: це гарантує гарне ковзання зразка.

-Размір краплі: при дуже великих краплях вийде густіший і довший мазок, при дуже маленькій краплі спред буде коротшим і надзвичайно дрібним.

-Швидкість, що застосовується в розширенні: чим менша швидкість, тим мазок буде тоншим, тим вище швидкість, він буде густішим.

-Куст виконання: чим менший кут, чим тонший мазок, тим більший кут товстіший.

-Наступ на покривало

Він не використовується широко, оскільки поводження з крихкими кришками громіздке, однак дає великі переваги, оскільки кращий розподіл клітин отримується по всьому мазку.

Не дуже густа, не дуже тонка крапля розміщується в центрі покривала. Одразу ж інший покрив розміщується поверх цього таким чином, що кінчики обох покривальних накладок виступають, утворюючи зірку.

Крапля мимовільно пошириться на поверхню обох покривнихпокришок. В кінці розширення кожен слайд швидко пересувається в протилежну сторону один від одного (один праворуч, а другий ліворуч).

Методика передбачає два мазки замість одного.

Їх поміщають для висихання розкладеною стороною вгору. Після висихання її фіксують і фарбують за вибором техніки. Дайте висохнути. Крапля зануреного масла поміщається на предметне скло мікроскопа, мазок кладуть мазком стороною вниз і оглядають під мікроскопом.

Контроль якості в техніці покриття

Щоб отримати хороший мазок для цієї методики, важливо:

-Почищення кришок (допомагає зразку плавно ковзати).

-Розмір краплі (впливає на товщину мазка).

-Швидкість, з якою відокремлюються кришки (впливає на однорідність розкидання).

-З автоматизованим обладнанням

Зробити це можна через будь-яку з цих команд: Spinner та Autoslide.

Spinner складається з розміщення слайда з краплею крові на спеціальній тарілці центрифуги. Зразок центрифугують з високою швидкістю; таким чином утворюється однорідний і тонкий мазок зразка. Він має недолік можливості гемолізу зразка.

Автослід - це інструмент, який механічно виконує рухи для виконання мазка на слайдах. Також можна зафіксувати і зафарбувати мазок. Він навіть може бути адаптований до деяких автоматичних лічильників гематології.

Техніка густого мазка

Для пошуку гемопаразитів рекомендується два мазки: один з тонкою краплею і один з густою краплею.

Зробіть пункцію капіляра, очистіть першу краплю. Помістіть дрібку краплі на гірку і намажте, як було пояснено раніше. Для густої намистини помістіть велику намистину на інший слайд і розкладіть на квадрат 1,55 мм. Нехай два мазки висохнуть.

Фарбування мазка

Плями від Giemsa або Wright, серед інших, можна використовувати для тонких крапель. Для густих мазків рекомендується пляма від Giemsa або May-Grunwald від Giemsa.

Пляма Giemsa

Мазок фіксують протягом 3 хвилин метанолом, зливають і дають знову висохнути. Потім мазок покривається плямою Giemsa на 10-15 хвилин. Його промивають дистильованою водою і дають висохнути. Для спостереження під мікроскопом поміщають краплю зануреного масла.

Райт пляма

Мазок покривається плямою Райт на 5 хвилин. Відкиньте і поставте буферний розчин при рН 6,8 на 6 хвилин. Збийте препарат до гомогенізації. Вимийте дистильованою водою і дайте висохнути. Поспостерігайте під мікроскопом.

Види дефектних мазків

Це відбувається у слухачів у техніці тонкої краплі зі слайдами.

Мазки з ділянками різної товщини (тонкі та густі вкраплення)

Це тому, що виконуваний рух не був постійним під час розповсюдження, роблячи зупинки та перезавантаження.

Дуже короткий мазок

У них є 2 причини: одна пов’язана з тим, що заземлення слайд було піднято до того, як дійти до іншого кінця слайда. У цьому випадку він надзвичайно товстий і короткий.

З іншого боку, якщо мазок короткий, але тонкий, це тому, що розмір краплі був дуже маленьким.

Намазати розігрітою областю до кінця мазка

Це має кілька причин: одна полягає в тому, що кромка заземлення є несправною, що тиск, який чинять на приймаючому слайді, збільшується під час розкидання або що зношений край слайда.

Мазок з утворенням вакуолі або чіткими округлими або еліптичними ділянками

Вони пояснюються вживанням жирних мазків (погано промиваються і знежирюються).

Дуже густі або дуже тонкі мазки

Занадто великі краплі дадуть дуже густі мазки від початку до кінця, і дуже маленькі краплі дадуть дуже тонкі мазки.

Гістологія

Кров’яні клітини можна побачити в мазку крові. Серед них:

-Еритроцити або еритроцити

Кров людини, еритроцити або еритроцити та два білих кров'яних тілець. Створено та відредаговано у: Viascos. Ваші спостереження мають надзвичайно важливе значення. На цьому рівні можуть бути виявлені анемії, таласемія, захворювання кісткового мозку тощо.

Кількість еритроцитів або еритроцитів становить приблизно 5 х 10 ⁶ мм3 у чоловіків і 4,5 х 10 ⁶ у жінок. Еритроцити мають форму двоякоподібних дисків, з центральною фізіологічною блідістю. Їх можна побачити окремо (нормально) або утворюючи рулеві стеки (аномальні).

У мазках також виявляється пойкілоцитоз (еритроцити різної форми), анізоцитоз (еритроцити різної величини), анізопоікілоцитоз (різної форми та розміру), анізохромія (різних кольорів), еритробласти (незрілі еритроцити), мікроцитоз (менші еритроцити) ) і макроцити (більші еритроцити).

Коли вони мають дефіцит кількості гемоглобіну і центральна блідість збільшується, говорять про наявність гіпохромії. Якщо спостерігається нормальна червона серія, вона повідомлятиметься про нормоцитарну та нормохромну.

-Білі клітини крові або лейкоцити

Лейкоцити

Нормальна кількість становить від 5000 до 10000 мм ³ . Вони змінюються при інфекційних процесах, алергії та лейкемії. У мазку крові можна виділити кілька типів, які пояснені нижче.

Сегментовані нейтрофіли

Вони становлять 55-65% від загальної кількості лейкоцитів. Вони вимірюють між 10-15 мкм. У них є сегментоване або лопатеве ядро, яке приймає різні морфології, тому воно називається поліморфноядерним.

Вони мають у своєму цитоплазмі рясні нейтрофільні гранули та деякі азурофіли. Вони посилюються при бактеріальних інфекціях (нейтрофілія), зменшуються вірусні інфекції (нейтропенія).

Можуть спостерігатися такі морфологічні відхилення, як плеокаріоцитоз (гіперсегментовані ядра), дуги (незрілі клітини) або макрополіси (овальної форми та великі).

Інші зміни:

-Токсичні грануляції

-Псевдопелгерові нейтрофіли (ядро не має лобуляцій або вони двобічні).

-Деле тіла: темно-сині цитоплазматичні включення.

-Підвищена цитоплазматична базофілія.

-Інтрацитоплазматичні вакуолі.

-Клітинний піноз (втрата міжядерних мостів).

Сегментовані еозинофіли

Вони становлять 1-3% від загальної кількості лейкоцитів. Вони вимірюють 9-10 мкм. Вони характеризуються наявністю рясних ацидофільних цитоплазматичних гранул та кількох азурофілів. Її ядро ​​має дві часточки. Їх кількість збільшується при алергії та захворюваннях паразитарного походження.

Сегментовані базофіли

Вони вкрай рідкісні, становлять 0-1% лейкоцитів. Вони вимірюють 10-12 мкм. Ядро, як правило, нерегулярне по краях і може бути білобедреним, але воно не спостерігається через велику кількість базофільних грубих грануляцій у його цитоплазмі. Дуже рідко можна побачити базофілію.

Лімфоцити

Вони являють собою невеликі клітини з базофільною цитоплазмою, з ядром, добре вираженими, круглими, зі згущеним хроматином. Ядро охоплює майже всю клітину. Вони становлять 26-40% лейкоцитів у крові. Вони посилюються при вірусних інфекціях (лімфоцитоз). Видно реактивні лімфоцити.

Моноцити

Клітини більші за лімфоцити, з більшою цитоплазмою та більш пухкими, овальними ядрами хроматину. Вони вимірюють 9-12 мкм. Цитоплазма рясна і зазвичай виявляється блідо-сірувато-синьою зі стандартними методами фарбування. Вакуолізовані моноцити та моноцитоз можуть спостерігатися серед змін.

-Плателети

Вони вимірюють між 1,5-3 мкм. Форма його кругла або овальна. Нормальне значення становить від 150 000 до 350 000 тромбоцитів / мм3. Вони можуть зменшитися при деяких вірусних інфекціях. Вони не мають ядра і забарвлені в фіолетовий колір. У цій серії можуть спостерігатися відхилення, такі як макро- або мікротромбоцити, тромбоцитоз або тромбоцитопенія та фрагменти тромбоцитів.

Патологічні елементи

Кров-паразити

Гемопаразити, такі як збудник малярії або малярії (паразити роду Plasmodium), можна побачити в мазках крові. З цієї причини важливо проаналізувати мазок вручну, оскільки автоматичне обладнання пропускає цей висновок.

Бактерії

При таких патологіях, як рецидивуюча лихоманка або хвороба Лайма, може спостерігатися його збудник. У цьому випадку це відповідає спирохетам Borrelia recurrenti та Borrelia burgdorferi в мазку крові.

Незрілі клітини

Важкі випадки спостерігаються серед лейкемій, лейкемоїдних реакцій та лейкоеритробластичної реакції. При бактеріальній інфекції можуть бути незначні відхилення вліво (наявність шахраїв). Еритробласти можуть спостерігатися і при деяких анеміях.

Список літератури

1. Кров і кровотворна тканина. Доступно за адресою: sld.cu
2. Гомес А, Касас М. 2014. Ангел. Клінічна лабораторна інтерпретація. 8-е видання. Редакція Médica Panamericana.
3. Solari Soto L, Soto Tarazona A, Mendoza Requena D, Llanos рахунки А. Порівняння щільності паразитів у густій ​​краплі венозної крові та акупресурі в діагностиці маларії vivax. Rev Med Hered 2002; 13 (4): 140-143. Доступно за адресою: scielo.org.
4. Террі Леонард Нельсон, Мендоса Ернандес Карлос. Важливість дослідження мазка периферичної крові у літніх людей. Medisur 2017; 15 (3): 362-382. Доступно за адресою: scielo.sld
5. Грінспан С. Дослідження мазка периферичної крові. Постійне медичне виховання. Доступний за адресою: bvs.hn/RMH