НЕФЕЛОМЕТРІЯ: З ЧОГО СКЛАДАЄТЬСЯ І ДОДАТКИ - ХІМІЯ - 2025

Нефелометрія включає в себе вимір випромінювання , викликаних частками (в розчині або суспензії) і вимірювання потужності розсіяного випромінювання під кутом до напрямку падаючого випромінювання.

Коли підвішена частинка потрапляє в промінь світла, є частина світла, яка відбивається, інша частина поглинається, інша відхиляється, а решта передається. Ось чому, коли світло потрапляє в прозоре середовище, в якому знаходиться суспензія твердих частинок, суспензія виявляється мутною.

Що таке нефелометрія?

Дисперсія випромінювання частинками в розчині

У той момент, коли світловий промінь потрапляє на частинки зваженої речовини, напрямок розповсюдження променя змінює свій напрямок. Цей ефект залежить від наступного:

1.Разміри частинки (розмір і форма).

2. Характеристика суспензії (концентрації).

3.Длина хвилі та інтенсивність світла.

4.Випад світлової відстані.

5. Кут виявлення.

6. Індекс заломлення середовища.

Нефелометр

Нефелометр - це прилад, який використовується для вимірювання зважених частинок у зразку рідини або в газі. Таким чином, фотоелемент, розміщений під кутом 90 ° до джерела світла, виявляє випромінювання частинок, присутніх у суспензії.

Так само світло, що відбивається частинками до фотоелемента, залежить від щільності частинок. На діаграмі 1 представлені основні компоненти, що складають нефелометр:

Малюнок 1. Основні компоненти нефелометра.

ДО.

У нефелометрії життєво важливим є джерело випромінювання з високою світловіддачею. Існують різні типи, починаючи від ксенонових ламп і ртутних ламп, галогенних вольфрамових ламп, лазерного випромінювання.

Б.

Ця система розташована між джерелом випромінювання та кюветою, так що таким чином уникнути випромінювання з різною довжиною хвилі в порівнянні з бажаною радіацією на кюветі.

В іншому випадку реакції флуоресценції або нагрівання в розчині можуть спричинити відхилення вимірювань.

C.

Це, як правило, призматична або циліндрична ємність, і вона може мати різні розміри. У цьому полягає досліджуване рішення.

D.

Детектор розташований на певній відстані (як правило, дуже близько до кювети) і відповідає за виявлення випромінювання, розсіяного частинками суспензії.

І.

Як правило, це електронна машина, яка приймає, перетворює та обробляє дані, які в цьому випадку є вимірюваннями, отриманими в результаті проведеного дослідження.

Відхилення

Кожне вимірювання схильне до відсотка помилки, яке в основному задається:

Забруднені клітини: у клітинах будь-який агент, що знаходиться поза досліджуваним розчином, усередині або поза клітиною, зменшує променеве світло на шляху до детектора (дефектні клітини, пил, що прилягає до стінок клітини).

Інтерференції : наявність мікробного забруднення або помутніння розсіює променисту енергію, збільшуючи інтенсивність дисперсії.

Флуоресцентні сполуки : це ті сполуки, які при збудженні падаючого випромінювання викликають помилкові та високі показники щільності розсіювання.

Зберігання реагентів : Неадекватна температура системи може спричинити несприятливі умови дослідження та може призвести до наявності каламутних або осаджених реагентів.

Коливання електричної потужності : щоб запобігти виникненню радіаційних випадків джерелом помилок, для рівномірного випромінювання рекомендуються стабілізатори напруги.

Метрологічні характеристики

Оскільки випромінювана потужність виявленого випромінювання прямо пропорційна масовій концентрації частинок, то теоретично нефелометричні дослідження мають більш високу метрологічну чутливість, ніж інші подібні методи (наприклад, турбідиметрія).

Крім того, ця методика вимагає розбавлених розчинів. Це дозволяє мінімізувати як явища поглинання, так і відображення.

Програми

Нефелометричні дослідження займають дуже важливе місце в клінічних лабораторіях. Застосування варіюються від визначення імуноглобулінів та білків гострої фази, комплементу та згортання.

Виявлення імунного комплексу

Коли біологічний зразок містить антиген, що представляє інтерес, його змішують (у буферному розчині) з антитілом, утворюючи імунний комплекс.

Нефелометрія вимірює кількість світла, яке розсіюється реакцією антиген-антитіло (Ag-Ac), і таким чином виявляються імунні комплекси.

Це дослідження може бути проведено двома методами:

Нефелометрія кінцевої точки:

Ця методика може бути використана для аналізу в кінцевих точках, коли антитіло досліджуваного біологічного зразка інкубують протягом двадцяти чотирьох годин.

Комплекс Ag-Ac вимірюється за допомогою нефелометра, а кількість розсіяного світла порівнюється з тим же вимірюванням, проведеним до того, як комплекс утворився.

Кінетична нефелометрія

У цьому методі швидкість утворення комплексу постійно контролюється. Швидкість реакції залежить від концентрації антигену в зразку. Тут вимірювання приймаються як функція часу, тому перше вимірювання проводиться в момент "нуля" (t = 0).

Кінетична нефелометрія є найбільш широко використовуваною методикою, оскільки дослідження може бути проведене за 1 годину, порівняно з тривалим періодом часу методом кінцевої точки. Коефіцієнт дисперсії вимірюється відразу після додавання реагенту.

Тому, поки реагент постійний, кількість присутнього антигену вважається прямо пропорційним швидкості зміни.

Інші програми

Нефелометрія зазвичай використовується в аналізі якості хімічної води для визначення чіткості та контролю процесів її очищення.

Він також використовується для вимірювання забруднення повітря, при якому концентрація частинок визначається з дисперсії, яку вони виробляють в падаючому світлі.

Список літератури

1. Britannica, E. (nd). Нефелометрія та турбідиметрія. Відновлено з britannica.com
2. Аль-Салех, М. (й). Турбідиметрія та нефелометрія. Отримано з pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (другий). Відновлено з сайту technochemical.com
4. Мораес, IV (2006). Турбідиметричний та нефелометричний аналіз потоку. Отримано з repository.ucp.p
5. Сассон, С. (2014). Принципи нефелометрії та турбідиметрії. Відновлено з Notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Стенлі, Дж. (2002). Основи імунології та серології. Олбані, Нью-Йорк: Томпсон навчання. Отримано з books.google.co.ve
7. Вікіпедія. (sf). Нефелометрія (ліки). Відновлено з сайту en.wikipedia.org