- Фундація та матеріали
- матеріали
- Кроки
- Макроскопічне та мікроскопічне дослідження
- Оригінальна техніка Фауста
- Техніка Фауста центрифугуванням
- Перевага
- Недоліки
- Список літератури
Техніка Фауст є методологію , яка дозволяє концентрацію деяких яєць і / або личинок паразитів , що містяться в екскрементах плаваючими. Застосовується, коли прямі копропаразитологічні тести негативні або коли ви бажаєте отримати чисті проби без детриту.
Методи концентрації для копропаразитологічних досліджень мають три типи: флотацією, осадженням або методами, що поєднують попередні два. Ці методи збільшують шанси на позитивні результати.
Аналіз стільця.
Метод Фауста полягає в змішуванні частини зразка калу з речовиною, щільнішою, ніж яйця або паразити, які слід зосередити. Це призводить до того, що, будучи менш щільними, вони пливуть на поверхні. Надосадову рідину збирають і переглядають під мікроскопом для ідентифікації та кількісного визначення.
Цей метод використовується для візуалізації яєць гельмінтів. У той же час він зарекомендував себе як дуже чутливий метод діагностики лямблій лямблій Giardia, джгутикових найпростіших, широко поширених у всьому світі. Методи флотації не рекомендуються для дуже важких яєць-паразитів, таких як стрічкові черв’яки та трематоди.
Паразити є однією з найпоширеніших кишкових інфекцій у всьому світі, особливо у бідних країнах із поганими санітарними заходами. З цієї причини наявність чутливих методів ідентифікації та кількісної оцінки цих паразитів дуже корисна для діагностики та лікування.
Фундація та матеріали
Метод заснований на існуванні різної питомої ваги яєць, паразитів, кіст, личинок та детриту, використовуючи розчини сульфату цинку як флотаційний метод.
Обґрунтуванням цієї методики є змішування зразка з розчином сульфату цинку, який має більшу щільність, ніж більш світлі яйця, личинки або паразити.
Це дозволяє осаджувати більш важкі елементи, а легші плавати, які з’являються в супернатанті після центрифугування зразків.
матеріали
Контейнери для збору фекальних зразків (Джерело: Bobjgalindo через Wikimedia Commons)
- Приготуйте розчин сульфату цинку щільністю 1,18 або 1,2 г / мл, якщо зразок був раніше оброблений.
- Підготуйте стійку з попередньо маркованими пробірками.
- Майте відцентрову машину.
- Майте під рукою слайди мікроскопа та кришки. Усі повинні бути марковані
- Переконайтесь, що доступний розчин Люголя для фарбування простирадла.
- Майте марлю для фільтрування.
- Майте воронки та дистильовану воду.
- Знайдіть етикетки з пластику або картону.
- Також аплікатори та стерильна ручка 5 мм.
- Запальничка для стерилізації ручки.
Кроки
Макроскопічне та мікроскопічне дослідження
Для будь-якого дослідження стільця експертиза починається з того, що називається "грубою експертизою" зразків.
Описано консистенцію, колір, присутність крові, присутність слизу та наявність паразитів у дорослих.
Потім переходимо до «мікроскопічного дослідження» стільця, це залежить від методу. Найпростішим є метод прямого мазка, який є найпростішим мікроскопічним методом спостереження за паразитами.
Фотографії спостереження лямблії Gardia, кишкового паразита (Джерело: Riddlemaster via Wikimedia Commons)
Процедура передбачає розміщення невеликої кількості зразка безпосередньо на слайді. Помістіть кілька крапель сольового розчину, які повинні бути схожими за розміром зразка. Змішують сольовий розчин зі стільцем до утворення однорідної суміші. Помістіть покривало і огляньте під мікроскопом.
Оригінальна техніка Фауста
Друга процедура складається з методу поплавка Фауста, оригінальна версія якого складається з:
1- Помістіть близько двох грам калу у відповідну для цього ємність.
2- Додайте 30 мл флотаційного розчину сульфату цинку, з яким готують емульсію шляхом змішування розчину з калом.
3- Процідіть металевим ситцем у другу ємність і перенесіть у пробірку.
4- Додайте ще розчин флотації, поки в трубці не утворюється меніск.
5- Помістіть скляну кришку на меніск. Дайте йому відпочити 10 - 15 хвилин.
6- Зніміть покривало і помістіть його на предметне скло, яке буде досліджено під мікроскопом.
Техніка Фауста центрифугуванням
Спочатку метод не використовував центрифугування, однак тепер він включений у міру отримання кращих результатів. Методика передбачає ряд кроків для досягнення належної процедури. Це такі:
1- Кал промивають водою, добре перемішують і потім фільтрують марлею, складеною в чотири. Зразок поміщають у пробірку.
2- Центрифугуйте і видаляйте супернатант (зразки, які зберігаються над водою). Етапи 1 і 2 повторюються, поки супернатант не стане "прозорим".
3- Фільтрований і центрифугований зразок додають 3-сульфат цинку.
4- Він добре перемішується.
Знов центрифугуйте протягом 1 хвилини при 2500 об / хв (обороти в хвилину).
6- Супернатант відновлюють стерильною петлею приблизно 5 мм; трубки не слід струшувати.
7- Зразок, вилучений із супернатанту, поміщають на предметне скло, і краплю Люголя можна розмістити за кольором, накривку поставити та спостерігати під мікроскопом.
8- Контейнери та пробірки маркують.
Перевага
- Елементи, які використовуються для діагностики, можна побачити чистими та без «детриту», це полегшує спостереження за аркушем та скорочує час, що використовується для діагностики.
- У супернатанті відновлюються як личинки, яйця та / або цисти.
- Це дуже низька вартість.
- Процедура дуже проста і проста у виконанні.
- Діагноз швидкий і точний.
- Завдяки важливості та високій захворюваності на паразитоз у бідних країнах ці недорогі та прості у використанні методи ідеальні для діагностики та моніторингу цих патологій.
Недоліки
Щільність флотаційного розчину виробляє скорочення личинок, тобто вони скорочуються і за дуже короткий період можуть деформуватися. Це змушує екзаменатора поставити діагноз негайно, і оброблені зразки не можуть бути збережені для подальших обстежень.
Як і у всіх методів мікроскопічної ідентифікації, для постановки точних діагнозів необхідний досвідчений дослідницький персонал.
Швидку деформацію елементів, необхідних для діагностики, хоча вони є очевидним недоліком, можна виправити шляхом негайних мікроскопічних спостережень.
Список літератури
- Ананія, Флорида (2017). Оцінка чутливості методу Фауста та спонтанного осідання для діагностики лямбліозу. Кубинський журнал тропічної медицини, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Порівняльна оцінка способу флотації модифікованого сульфату цинку. Журнал клінічної мікробіології, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Чутливість та ефективність вибраних копроскопічних методів - осадження, комбінованого осадження сульфату цинку-флотації та методу Макмастера. Паразитологічні дослідження, 115 (7), 2581-2587.
- Гарсія, Л.С., Арровуд, М., Кокоскін, Е., Палтрідж, Г.П., Піллай, ДР, Прокоп, GW,… & Visvesvara, Г. (2018). Лабораторна діагностика паразитів з шлунково-кишкового тракту. Клінічні огляди мікробіології, 31 (1), e00025-17.
- Саммерс, штат Вашингтон (1942). Модифікація методу відцентрової флотації сульфату цинку для відновлення яєць гельмінта в формалізованому калі. Журнал паразитології, 28 (4), 345-346.