ЗАСІБ СТЮАРТ: ОСНОВА, ПІДГОТОВКА ТА ВИКОРИСТАННЯ - БІОЛОГІЯ - 2025

Середа Стюарт є напівтвердий агар або бульйон без поживних речовин, що використовується для транспортування біологічних зразків. Її мета - зберегти штами, присутні у зразку, життєздатними протягом певного часу, але без збільшення мікробної популяції.

Його створили Моффет, Янг та Стюарт у 1948 році та пізніше модифікували Тошач та Пацула. До його складу входять гліцерофосфат натрію, тіогліколь натрію, хлорид кальцію та агар-агар. Останній присутній у напівтвердому середовищі та відсутній у рідині. Деякі лабораторії додають до нього метиленовий синій.

Культет з транспортом Стюарт. Джерело: Автор: CDC / Dr. Гілда Джонс, люб’язно: Бібліотека зображень громадського здоров'я

Вони, як правило, використовуються, коли висіяти зразок неможливо негайно. У цьому випадку зразок поміщають у транспортне середовище, при цьому він передається в лабораторію, яка буде обробляти культуру.

Таким чином гарантується, що присутні мікроорганізми залишаться живими до тих пір, поки вони не будуть прищеплені до відповідних культурних середовищ.

Спочатку його використання було призначене для транспортування уретральних або вагінальних зразків, де підозрювали наявність Neisseria gonorrhoeae. Пізніше вони зрозуміли, що його корисність може бути ширшою.

Середовище Стюарт виявилося дуже ефективним у збереженні лабільних і в'язких мікроорганізмів, таких як Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, серед інших. Крім інших не дратівливих мікроорганізмів, таких як ентеробактерії.

Середовище Стюарт в основному запобігає висушуванню зразка, підтримує осмотичний баланс і зберігає мікроорганізми при ідеальному pH. З іншого боку, стратегічно цей засіб не містить поживних речовин, тим самим перешкоджаючи розмноженню мікроорганізмів.

На ринку є спеціальні зразки транспортних пристроїв, що містять той чи інший транспортний засіб, зване культут. Вони також можуть бути підготовлені в лабораторії.

Основа

Мета транспорту Стюарт - зберегти зразки максимально близькими до їх первісного стану до моменту їх обробки.

Гліцерофосфат натрію та хлорид кальцію - це буферна система, яка працює, підтримуючи pH та осмолярність.

Тим часом тіогліколят натрію діє як відновлюючий засіб, а у разі вмісту агару він надає йому напівтверду консистенцію, затримуючи оксигенацію середовища. Нарешті, метиленовий синій - показник окиснення, тобто він виявляє наявність кисню.

Напівтверде середовище з окислювально-відновним індикатором ідеально підходить для транспортування зразків, де підозра на наявність анаеробних бактерій.

Характеристика транспортних засобів

Засіб Стюарт, як і всі транспортні засоби, відповідає певним характеристикам, включаючи:

-Зберігає життєздатні мікробні штами, присутні без розмноження.

-Не містить поживних речовин; Її сполуки спрямовані на підтримання зразка гідратним при належних умовах рН та осмолярності.

-Інгібує автолізат деяких делікатних мікроорганізмів, таких як пневмокок.

-Використання його тимчасове, його не слід занадто довго продовжувати.

Підготовка

Напівтверде середовище Stuart з окислювально-відновним індикатором

Підготовка додому

Інгредієнти

Гліцерофосфат натрію 10 гр

Тіогліколят натрію 1,0 гр

Хлорид кальцію 0,1 гр

Метиленовий синій 0,002 гр

Агар-агар 3 гр

Дистильована вода 1 л

Змішайте компоненти і нагрівайте до повного розчинення. Налийте в пробірки або спеціальні тампони. Їх вводять в автоклав і стерилізують при 121ºC протягом 15 хвилин. Нехай трубки охолонуть у вертикальному положенні (у формі блоку). Зберігати при кімнатній температурі.

Підготовка з комерційним середовищем

Зважте 14,1 г середовища в 1 л дистильованої води. Тепло часто струшуючи до повного розчинення, можна кип'ятити. Решта процедури як уже описано.

Зневоднене середовище кремового кольору і підготовлене повинно бути синього кольору на його поверхні. Це пов’язано з наявністю метиленового синього.

РН середовища повинен бути відрегульований до 7,4 ± 0,2

Рідина з модифікованою рідиною Stuart (домашня)

Інгредієнти

Гліцерофосфат натрію 10 гр

Тіогліколят натрію 1 гр

Дигідрат хлориду кальцію 0,1 гр

Дистильована вода 1000 мл

Він має ті ж інгредієнти, що і напівтвердий, але в ньому немає агару або метиленового синього. У цьому випадку компоненти змішуються без нагрівання і 0,5 мл розподіляється в пробірки розміром 16 х 125 мм з гвинтовими кришками.

Його стерилізують в автоклаві при 121 ° С протягом 10 хвилин. Для відбору проб слід використовувати тампони для дакрона, якщо зразок є для ПЛР або району, якщо це для культури.

Пробірки зберігають при кімнатній температурі.

Програми

Комерційно існують спеціальні пристрої для транспортування зразків, які називаються культура; Цей пристрій являє собою витягнуту тонку трубку, яка має тампон всередині, а в кінці є сегмент, який містить напівтверде або рідке середовище Стюарт.

Пристрій відкривають, а пробу беруть тампоном. Потім його вводять назад в трубку до тих пір, поки кінчик тампона не буде вставлений у напівтверде транспортне середовище; Деякі приносять поліуретанову губку, просочену рідким середовищем Стюарт, за допомогою якої зразок зберігається при зберіганні вологим.

У разі підозри на наявність делікатних мікроорганізмів для збору проби слід використовувати ватні тампони з деревним вугіллям.

Зразки, які можна взяти з тампонів або тампонів і перенести в цьому середовищі, - це ексудати глотки, матки прямої кишки та різні виділення, включаючи: вагінальний, уретральний, рановий, очний, вушний та абсцесний.

Під час передачі зразка в транспортному середовищі до лабораторії слід уникати впливу середовища в екстремальні умови навколишнього середовища (занадто холодні або занадто гарячі). Також слід уникати раптових змін атмосферного тиску.

Час, в який середовище здатне підтримувати мікроорганізм життєздатним, буде залежати від відповідного штаму. Наприклад, для мікроорганізмів роду Neisserias і Haemophilus вони можуть зберігати життєздатність до 24 годин, але такі штами, як Salmonella або Shigella, можуть тривати дні і навіть тижні.

Якщо вважається, що обробка зразка може зайняти більше 4 днів, бажано заморожувати зразок при температурі -70 ° C.

Ідентифікація зразка в транспортних засобах

На підготовленому транспортному засобі або на комерційній культурі має бути етикетка, де буде розміщена така інформація:

Ім'я та прізвище пацієнта: уникає плутанини зразка.

Ідентифікаційний номер: зручно тримати замовлення на роботі.

Джерело збору проб: допомагає бактеріологу вибрати відповідний культуральний носій.

Лікар, що відвідує: Іноді це необхідно для можливих консультацій.

Дата та час відбору зразка: це необхідно для прийняття чи відхилення зразка відповідно до часу, що минув між забором зразка та прийомом у лабораторію.

Інша інформація, яку було б дуже корисно долучити:

Імовірний діагноз: спрямовує додавання спеціальних культуральних середовищ відповідно до підозрюваного діагнозу.

Лікування антибіотиками: корисно його додавати до антибіограми.

Вся ця інформація є життєво важливою для належної обробки зразків.

QA

Для оцінки продуктивності середовища Стюарт відомі штами можна прищеплювати і зберігати при 25 ° С, таких як: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 630.

В усіх випадках очікується відновлення відповідного мікроорганізму, який зберігається протягом 24 годин.

З іншого боку, можуть використовуватися інші штами, такі як: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 та Escherichia coli ATCC 11775.

У всіх випадках очікується рясне одужання до 96 годин.

Обмеження

Деякі дослідження запевняють, що гліцерофосфат, присутній у середовищі Стюарт, може метаболізуватися деякими коліформами, серед інших грамнегативними бактеріями, і тому розмножуватися в цій середовищі.

Цей ризик збільшується, чим довше затримується обробка зразка. Так само на це впливає вплив середовища Стюарт високим температурам під час транспорту.

Список літератури

1. "Середовище транспорту (мікробіологія)." Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 13 квітня 2018, 10:36 UTC. 1 квітня 2019. Доступно за адресою: es.wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Media Media. Транспорт Стюарт. Доступно за адресою: Доступно за адресою: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Транспортні засоби Стюарта. Доступно за адресою: lablinsan.cl
4. Науковий МДМ. Переваги наявності мікробіологічного транспортного середовища Stuart. Доступно за адресою: mdmcientifica.com
5. Metrix Laboratories. Стюарт. 2017. Доступний за адресою: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Мікробіологічна діагностика Бейлі та Скотта. 12 ред. Редакція Panamericana SA Аргентина.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Мікробіологічна діагностика. 5-е видання. Редакція Panamericana SA Аргентина.